新型新辅助免疫疗法联合化疗（neoICT）改善了食管鳞状细胞癌（ESCC）患者的预后，但低反应率和治疗耐药性仍然存在挑战。对于 ESCC 肿瘤微环境 (TME) 的肿瘤内异质性知之甚少，这种异质性是对新辅助治疗的不同反应的基础。我们应用单细胞 RNA 测序 (scRNA-seq) 分析和多重免疫荧光染色来彻底解读来自新辅助抗 PD1 联合治疗临床试验的 ESCC 标本中的 TME。新辅助治疗后，癌症相关成纤维细胞（CAF）群体的丰度发生了显着变化。具体来说，IL6  CCL2  免疫调节CAF和新型CD248  机械响应CAF子集表现出浸润增加。从机制上讲，CD248 机械反应性 CAF 接近并排列在肿瘤巢内，以物理方式阻断 CD8  T 细胞的浸润和药物输送，而 IL6 CCL2  免疫调节性 CAF 则通过不同的 IL-6 表达诱导治疗抵抗。在接受 neoICT 治疗的患者中，我们观察到显着的 CAF-T 细胞相互作用。特别是，NECTIN2-TIGIT 配体-受体对在处理的样品中富集，TIGIT 被确定为 T 细胞的主要抑制检查点。我们的研究结果表明，TME 成分对新辅助免疫治疗的反应发生了明显改变，并确定了与患者不利治疗反应相关的 CAF 功能表型。这提供了增强 ESCC 新辅助治疗反应的潜在目标。© 2024。作者。

胶质瘤是脑部最常见的原发性恶性肿瘤，即使采用手术切除、放疗、化疗等标准治疗，患者的长期生存率仍不理想。复发是神经胶质瘤患者死亡的主要原因之一。神经胶质瘤复发的分子机制仍不清楚。我们的研究利用单细胞测序、空间转录组学和 RNA-seq 数据来鉴定与神经胶质瘤复发相关的 FN1  肿瘤相关巨噬细胞 (FN1  TAM) 的亚型。这项研究揭示了丰度增加FN1  TAMs 在复发性神经胶质瘤中的存在，表明它们可能是神经胶质瘤复发的关键因素。原发性胶质瘤中 FN1  TAM 的丰度与复发间隔时间呈负相关，提示 FN1  TAM 水平高的胶质瘤患者预后较差。进一步的研究表明，FN1  TAMs在缺氧肿瘤区域富集，这意味着肿瘤中的代谢变化驱动了FN1  TAMs的产生和募集。此外，FN1 TAM 被发现有助于调节神经胶质瘤中的免疫抑制微环境，其丰度可能作为患者对免疫治疗敏感性的指标。最后，我们开发了一个用户友好的网站 PRIMEG ( http://www.szflab.site/PRIMEG/ )，用于探索原发性和复发性胶质瘤的免疫微环境。我们的研究结果强调了与胶质瘤复发相关的 FN1   TAM 亚型，为潜在的治疗靶点提供新的见解。此外，丰富的 FN1  TAM 有望预测免疫治疗反应并帮助对复发性神经胶质瘤患者进行更精确的风险分层。© 2024。作者。

男性前列腺衰老是一个不可避免的过程，前列腺会发生增生，这种增生可能会导致尿道受压，导致排尿功能障碍和相关症状，并增加患前列腺癌的风险。尽管前列腺衰老具有重要意义，但所涉及的分子机制仍不完全清楚。收集年轻（2 个月）和老年（24 个月）小鼠的前列腺裂片，用于单细胞 RNA 测序 (scRNA-seq) 分析。该研究包括前前列腺（AP）和腹侧/背侧/外侧前列腺（VDLP）的组织。数据分析包括使用统一流形近似和投影 (UMAP) 算法进行无监督聚类，以根据标记基因表达来识别不同的细胞类型。进行差异基因表达分析，以确定不同细胞类型的基因表达与年龄相关的变化。进行功能富集分析以阐明与差异表达基因相关的生物学途径。此外，还分析了细胞相互作用和发育轨迹，以表征前列腺衰老过程中的细胞动力学。衰老过程中小鼠前列腺的单细胞转录组分析揭示了各种细胞类型的异质性及其在衰老过程中的变化。我们发现老年小鼠的间充质细胞和免疫细胞的比例显着增加。我们的研究揭示了与细胞衰老、氧化应激和上皮细胞再生相关的基因和途径的改变。此外，我们观察到基底细胞可能经历上皮间质转化（EMT）成为间质细胞，在老年小鼠中尤其突出。此外，免疫细胞，特别是巨噬细胞和 T 细胞，在老年小鼠中表现出增强的炎症反应。 总之，我们的研究对老年和年轻小鼠前列腺的单细胞转录组进行了比较分析，阐明了老年小鼠和年轻小鼠前列腺之间的细胞和分子变化。老年和年轻小鼠前列腺。© 2024。作者。

非酒精性脂肪肝病 (NAFLD) 是一种以脂肪堆积为特征但不过度饮酒的肝脏疾病，是一个重大的全球健康负担。 NAFLD 发病机制背后复杂的分子格局涉及脂质处理、炎症、氧化应激和线粒体功能障碍，其中内质网 (ER) 应激成为关键因素。 ER 应激触发未折叠蛋白反应 (UPR)，影响 NAFLD 中的肝脂肪变性，并导致炎症、纤维化和 NASH 进展，最终发展为肝细胞癌 (HCC)。热休克蛋白 (HSP)，包括 HSP20 和 HSP27、HSP60、HSP70、GRP78 和 HSP90 等小 HSP，是细胞应激反应不可或缺的一部分。它们有助于蛋白质折叠、防止聚集并促进降解，从而减轻应激条件下的细胞损伤。在 NAFLD 中，异常的 HSP 表达和功能有助于疾病发病机制。了解 HSP 亚型在 NAFLD 中的具体作用可以为潜在的治疗干预提供见解。这篇综述讨论了 HSP 在 NAFLD 病理生理学中的参与，并强调了它们的治疗潜力。通过阐明 NAFLD 中 HSP 介导的保护作用的分子机制，本文旨在为这种常见肝脏疾病的靶向治疗的开发铺平道路。© 2024。作者。

肝纤维化是一种慢性长期疾病，可发展为肝细胞癌（HCC）并最终导致肝功能衰竭。早期诊断和有效治疗仍面临重大挑战。肝脏炎症通过肝星状细胞（HSC）的持续激活和免疫细胞的积累导致肝纤维化。各种免疫细胞之间的细胞内通讯对于介导纤维形成过程中的炎症反应很重要。细胞外囊泡（EV）是细胞自然分泌的脂质双层膜包裹的颗粒，对细胞间通讯和生物活性分子的运输做出了巨大贡献。几乎所有参与肝纤维化的细胞都会释放负载脂质、蛋白质和核酸的 EV。来自肝细胞、免疫细胞和干细胞的 EV 参与介导肝纤维化的炎症微环境。最近，越来越多的基于细胞外囊泡的临床应用出现，为肝纤维化提供了有前景的无细胞诊断和治疗工具，因为它们在发病过程中的免疫调节中发挥着至关重要的作用。基于细胞外囊泡的疗法的优点包括稳定性、生物相容性、低细胞毒性和最小的免疫原性，这凸显了它们在药物递送和肝纤维化特异性治疗方面的巨大潜力。在这篇综述中，我们总结了 EVs 在肝纤维化发病机制中炎症反应中的复杂生物学功能，并评估了 EVs 在肝纤维化诊断和治疗中的潜力。© 2024。作者。

由代谢功能障碍相关脂肪性肝炎 (MASH) 引起的肝细胞癌 (HCC) 提出了重大的临床挑战，特别是考虑到西方饮食 (WD) 的盛行。饮食对肿瘤微环境的影响仍然知之甚少。半乳糖凝集素-1 (Gal-1) 是 HCC 的生物标志物，在肝癌发生中发挥着至关重要的作用。我们之前的研究表明，沉默 Gal-1 可以有效治疗小鼠 HCC。然而，WD 对 Gal-1 信号传导对 MASH 向 HCC 进展的影响尚不清楚，本研究解决了这些知识空白。我们开发了一种新型 MASH-HCC 小鼠模型。利用空间转录组学和多重免疫组织化学 (IHC)，我们研究了 WD 对肝脏和肿瘤微环境的影响。通过沉默和过度表达来调节 Gal-1 表达，我们探索了 WD 对 Gal-1 信号传导的位置特异性影响。Rho 信号传导、细胞外基质 (ECM) 重塑和衰老相关分泌表型 (SASP) 等途径最为显着。与健康肝脏对照相比，WD 诱导的代谢功能障碍相关脂肪肝 (MAFLD) 和 MASH-HCC 中被激活。此外，Rho GTPase 效应子、ECM 重塑、中性粒细胞脱粒、细胞应激和细胞周期途径在人和小鼠 MASH-HCC 中持续丰富。在空间上，这些通路在小鼠 MASH-HCC 的肿瘤和肿瘤边缘富集。此外，从非肿瘤组织到肿瘤边缘和 MASH-HCC 肿瘤内部的 CD11c 和 PD-L1 阳性细胞显着增加，表明摄入 WD 导致免疫监视受损。此外，MASH-HCC 在 N-钙粘蛋白阳性细胞中表现出显着的 Gal-1 诱导，表明上皮间质转化 (EMT) 增强。调节 MASH-HCC 中的 Gal-1 表达进一步确立了其在调节 MASH-HCC 肿瘤边缘和非肿瘤组织中的 Rho 信号传导和 SASP 中的特定作用。WD 摄入显着影响参与 Gal-1 介导的信号传导的重要细胞过程，包括肿瘤微环境中的 Rho 信号传导和 ECM 重塑，从而促进 MASH-HCC 的发展。© 2024。作者。

耗竭是影响嵌合抗原受体T（CAR-T）细胞功效的关键因素。我们之前的研究表明，溴结构域蛋白 4 (BRD4) 抑制剂可以改变白血病患者耗尽的 T 细胞的表型和功能。本研究旨在利用单细胞 RNA 测序 (scRNA-Seq) 阐明 BRD4 抑制剂减少 CAR-T 细胞耗竭的机制。通过与 CD123 抗原阳性 MV411 共培养来制备耗竭的 CD123 特异性 CAR-T 细胞细胞。消除 MV411 细胞并上调表面抑制性受体后，用 BRD4 抑制剂 (JQ1) 处理耗尽的 CAR-T 细胞 72 小时。随后分离出 CAR-T 细胞，并进行 scRNA-Seq 来表征 JQ1 处理细胞的表型和功能变化。 JQ1 处理后的 CD8 CAR-T 细胞耗竭比例和 CAR-T 细胞耗竭评分均下降与对照处理的细胞相比。此外，与终末耗尽的 CD8 CAR-T 细胞相比，JQ1 治疗导致初始、记忆和祖细胞耗尽的 CD8 CAR-T 细胞比例更高，并伴有增殖、分化和激活能力增强。此外，通过 JQ1 治疗，幼稚型、记忆型和祖细胞耗尽型 CD8 CAR-T 细胞中的 BATF 活性和表达降低，而 EGR1 活性和表达增加。有趣的是，具有较高 EGR1 和 EGR1 靶基因 ssGSEA 评分，加上较低 BATF 和 BATF 靶基因 ssGSEA 评分的 AML 患者预后最好。我们的研究表明，BRD4 抑制剂可以减少 CAR-T 细胞耗竭并阻断耗竭的 T 细胞末端通过下调 BATF 活性和表达以及上调 EGR1 活性和表达来实现分化，提出了一种提高 CAR-T 细胞疗法有效性的方法。© 2024。作者。

基于免疫检查点阻断的治疗彻底改变了癌症治疗。尽管取得了显着的成功，并且针对其他检查点的多种检查点抑制剂的临床前开发也已完成，但只有针对 PD-1/PD-L1 轴和 CTLA-4 的抗体已被批准用于患者治疗，特别是实体瘤。目前，随着Relatlimab的批准，第三种LAG-3阻断抗体已被用于抗击癌症。 relatlimab 的认可标志着癌症免疫治疗的一个重要里程碑，为联合治疗和增强治疗效果开辟了新途径。然而，LAG-3 复杂的生物学特性可能会阻碍其作为治疗替代品的全面发展。在这篇综述中，我们深入了解 LAG-3 的生物学及其在癌症治疗方面当前和未来的发展。© 2024。作者。

在许多成年实体瘤中，正在研究用于过继性细胞治疗的肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）的扩增。骨髓浸润淋巴细胞（MIL）已在临床前证明具有抗肿瘤反应活性。在儿科实体瘤组织学中尚未有 TIL/MIL 成功扩增的报道。本研究的目的是证明从儿科实体瘤中成功扩增 TIL，以转化为过继细胞疗法 (ACT) 治疗策略。对接受标准治疗的儿科患者实体瘤进行了 TIL/MIL 扩增的前瞻性研究。护理程序。 TIL/MIL 扩增是在高剂量白细胞介素 2 存在的情况下进行的。为了证明 TIL 治疗的临床相关细胞剂量的全面扩增，在初始 TIL 培养后，对选定的患者进行了快速扩增方案。通过流式细胞术分析扩增样本的表型并通过干扰素-γ释放测定分析抗肿瘤反应性。获得18个肿瘤样本。 14/18 个样本 (77.7%) 成功生成了初始 TIL 培养物。初始培养物产生中位数 5.52 × 107（范围：2.5 × 106-3.23 × 108）个细胞，其中 46.9% 表达 CD3 表型 (46.9%)。 8 个样本经历了快速扩增，显示中位扩增量为 458 倍，CD3 表型为 98%。最初的 MIL 培养物成功地从五个样品中产生，主要是 CD3 表型 (45.2%)。仅提供了 7 个 TIL 样本的足够肿瘤组织来测试反应性；没有一个表现出对自体肿瘤的反应。儿童实体瘤的 TIL 和 MIL 扩增是成功的，包括全面的扩增过程。该数据支持在儿科人群中转化为 ACT-TIL 治疗策略，因此计划对儿科高危实体瘤进行 ACT-TIL 的 I 期试验。版权所有 © 2024 国际细胞学会

不变自然杀伤 T (iNKT) 细胞是 T 淋巴细胞的一小部分，具有很强的细胞毒性和免疫调节特性。我们之前表明，人类培养扩增的 iNKT 细胞可防止同种异体反应并裂解原发性白血病母细胞。在这里，基于免疫调节能力，iNKT 细胞比 T 细胞有几个优势。由于嵌合抗原受体 (CAR) 增加了免疫效应细胞的益处，因此它们在提高 iNKT 细胞等新型细胞疗法的细胞毒能力方面发挥着至关重要的作用。在本研究中，我们研究了 NK 细胞的反式激活以及通过 CD19 定向 CAR 转导的 iNKT 细胞预防同种异体反应。 iNKT 细胞通过磁性细胞分离技术从外周血单核细胞中分离出来，并用 CD19-CAR 逆转录病毒转导。通过流式细胞术测量转导效率、纯度和细胞亚群。已经建立了反式激活和细胞毒性测定法来研究 CD19-CAR-iNKT 细胞反式激活原代 NK 细胞的能力。进行混合淋巴细胞反应（MLR）以探讨 CD19-CAR-iNKT 细胞对同种异体反应性 CD3 T 细胞的抑制作用。 CD19-CAR-iNKT 细胞能够不依赖于细胞接触而反式激活 NK 细胞：用 CD19-CAR-iNKT 细胞预处理的 NK 细胞中，激活标记物 CD69 的表达显着增加，促炎细胞因子干扰素-γ 的产生也更高。因此，此类 NK 细胞的细胞毒活性显着增加，能够比没有事先反式激活更有效地裂解白血病细胞。将 CD19-CAR-iNKT 细胞添加到 MLR 中，会导致用 HLA 不匹配的树突状细胞刺激的同种异体反应性 CD3 T 淋巴细胞上 T 细胞激活标记物 CD25 的表达降低。此外，在这种情况下，同种异体反应性 CD3 T 淋巴细胞的增殖显着减少。我们证明，尽管用 CAR 转导，CD19-CAR-iNKT 细胞仍保持其免疫调节特性，使其成为同种异体造血细胞移植后应用的有吸引力的效应细胞群。通过反式激活 NK 细胞、增加其细胞毒性活性并抑制同种反应性 T 细胞，它们可能会通过预防复发和移植物抗宿主病进一步改善治疗结果。版权所有 © 2024 国际细胞学会