离体药物反应分析是研究基因型-药物反应关联的强大工具，并且正在探索作为癌症精准医学的工具集。在这里，我们进行了一项前瞻性非干预性试验，以研究体外药物反应分析用于指导血液恶性肿瘤治疗的可行性（SMARTrial，NCT03488641）。 91% 的研究参与者达到了在 7 天内提供药物反应分析报告的主要终点 (N = 80)。次要终点分析显示，体外对化疗药物的耐药性预示着体内化疗治疗的失败。我们在由 95 名接受柔红霉素和阿糖胞苷治疗的急性髓系白血病患者组成的验证队列中证实了离体化疗反应的预测价值。体外药物反应概况改善了具有不良风险的个体的 ELN-22 风险分层。我们的结论是，离体药物反应分析在临床上是可行的，并且有可能预测患有超出临床确定的遗传标记的血液恶性肿瘤个体的化疗反应。© 2023。作者。

急性髓系白血病 (AML) 是成人中最常见的白血病，是由有限数量的基因中反复出现的体细胞获得性遗传损伤引起的。酪氨酸激酶抑制剂治疗已证明，尽管 FLT3 抑制剂消除 FLT3 突变克隆的功效存在差异，但针对常见的 FMS 相关受体酪氨酸激酶 3 (FLT3) 功能获得性突变的靶向治疗可为患者带来显着的生存获益。我们鉴定了一种 T 细胞受体 (TCR)，它对 FLT3 酪氨酸激酶结构域 (TCRFLT3D/Y) 中反复出现的 D835Y 驱动突变有反应。 TCRFLT3D/Y 重定向 T 细胞在体外和体内选择性消除含有 FLT3D835Y 突变的原代人类 AML 细胞。在移植了来自患者的原发性白血病的小鼠中，TCRFLT3D/Y细胞排斥CD34和CD34-AML，达到最小残留疾病阴性水平，并消除体内原发性CD34 AML白血病增殖细胞。因此，针对单一共享突变的 T 细胞可以提供有效的免疫疗法，选择性消除体内涉及克隆的原代 AML 细胞。© 2023。作者。

胰腺导管腺癌 (PDAC) 细胞使用谷氨酰胺 (Gln) 来支持增殖和氧化还原平衡。早期尝试使用谷氨酰胺酶抑制剂抑制谷氨酰胺代谢，导致快速代谢重编程和治疗耐药。在这里，我们证明用 Gln 拮抗剂 6-diazo-5-oxo-L-norleucine (DON) 处理 PDAC 细胞会导致体外代谢危机。此外，我们在使用sirpiglenastat (DRP-104)的几个体内模型中观察到肿瘤生长显着减少，sirpiglenastat (DRP-104)是DON的前药版本，旨在规避与DON相关的毒性。我们发现细胞外信号调节激酶（ERK）信号传导作为一种补偿机制而增加。 DRP-104 和曲美替尼的联合治疗导致 PDAC 同基因模型的生存率显着增加。这些概念验证研究表明，广泛针对 Gln 代谢可以为 PDAC 提供治疗途径。与 ERK 信号通路抑制剂的组合可以进一步改善治疗结果。© 2023。作者。

在胰腺导管腺癌 (PDAC) 中，谷氨酰胺是一种关键营养素，可驱动支持肿瘤生长的各种代谢和生物合成过程。在这里，我们阐明了 6-重氮-5-氧代-L-正亮氨酸 (DON)（一种广泛抑制谷氨酰胺代谢的谷氨酰胺拮抗剂）如何阻止 PDAC 肿瘤生长和转移。我们发现 DON 通过抑制天冬酰胺合成酶 (ASNS) 显着减少天冬酰胺的产生，并且天冬酰胺可以挽救 DON 的作用。作为一种代谢适应，PDAC 细胞响应 DON 上调 ASNS 表达，我们发现 ASNS 水平与 DON 功效呈负相关。我们还表明，L-天冬酰胺酶 (ASNase) 与 DON 协同作用，影响 PDAC 细胞的活力，并且 DON 和 ASNase 联合治疗对转移有显着影响。这些结果揭示了驱动谷氨酰胺拟态效应的机制，并指出了共靶向适应性反应在控制 PDAC 进展方面的效用。© 2023。作者获得 Springer Nature America, Inc. 的独家许可。

体外转录 (IVT) mRNA 已成为生产核酸药物的快速方法。在这里，我们构建了一种溶瘤 IVT mRNA，它利用人鼻病毒 2 型 (HRV2) 内部核糖体进入位点 (IRES) 选择性触发高表达 EIF4G2 和 PTBP1 的癌细胞中的翻译。溶瘤作用是由长 hGSDMDc .825 T>A/c.884 A>G-F1LCT 突变体 mRNA 序列提供的，其线粒体内膜心磷脂靶向触发线粒体自噬的毒性。利用重排内含子-外显子 (PIE) 剪接环化策略和脂质纳米颗粒 (LNP) 封装降低了 mRNA 的免疫原性，并能够在体内递送至真核细胞。工程化 HRV2 IRESs-GSDMDp.D275E/E295G-F1LCT circRNA-LNPs (GSDMDENG circRNA) 成功抑制 EIF4G2 /PTBP1 全腺癌异种移植物的生长。重要的是，在由KRAS G12D突变引起的EIF4G2和PTBP1异常的自发性肿瘤模型中，GSDMDENG circRNA显着预防胰腺癌、肺腺癌和结肠腺癌的发生，提高存活率并诱导持续的KRAS G12D肿瘤抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞应答。 © 2023。作者获得 Springer Nature America, Inc. 的独家许可。

我们进行了一项登记分析，包括接受噻替派、白消安和氟达拉滨 (TBF) 或基于三硫丹 (Treo) 调理的成人急性髓系白血病 (AML) 缓解期患者进行单倍体造血干细胞移植 (HSCT) 和移植后环磷酰胺治疗。 2010 年至 2020 年间，共有 1123 名患者符合纳入标准（968 名患者接受 TBF，155 名患者接受 Treo）。对 142 名 TBF 和 142 名 Treo 患者进行了 1:1 配对分析。在Treo组中，68%的患者接受剂量≥36g/m2的曲硫丹，54%的患者接受第二种烷化剂（塞替派或美法仑）。我们观察到，与 Treo 组相比，TBF 组在 180 天时 II-IV 级急性 (a) 移植物抗宿主病 (GVHD) 的发生率有增加的趋势（29% 对比 20%；P = 0.08），而III-IV级aGVHD没有统计学差异。同样，慢性 (c) GVHD 的发生率在两组中没有统计学差异。 TBF 中 2 年非复发死亡率为 19%，Treo 中为 14%（P = 0.4）。两组的 2 年复发率没有统计学差异（TBF 和 Treo 分别为 16% 和 18%；P = 0.9）。无白血病生存率、总生存率以及无 GVHD、无复发生存率分别为 65% 与 68% (P = 0.6)、73% 与 76% (P = 0.5) 以及 54% 与 53% (P = 0.8) ）分别在 TBF 与 Treo 中。总之，我们在本研究中没有发现两种条件作用之间存在显着差异； Treo 和 TBF 代表了单倍体造血干细胞移植 (haplo-HSCT) 和 PTCy 治疗缓解期 AML 的 2 种有效替代方案。版权所有 © 2023 作者。由 Wolters Kluwer Health, Inc. 代表欧洲血液学协会出版。

最近的证据揭示了克隆造血（CH）和为治疗血液恶性肿瘤而建立的细胞疗法之间的重要相互作用。 CH 对嵌合抗原受体 (CAR) T 细胞疗法的安全性、有效性和结果的影响目前正在研究中。我们分析了 110 名复发/难治性 B 细胞非霍奇金淋巴瘤 (n = 105) 或急性淋巴细胞白血病 (ALL) (n = 5) 患者，接受 Axicabtagene-Ciloleucel (39%)、Tisagenlecleucel (51%) 或Brexucabtagene autoleucel (10%)。使用纠错靶向测序，检测到 CAR T 细胞输注时 CH 患病率高达 56.4%（变异等位基因频率 [VAF] ≥1%）。最常见的突变基因是 PPM1D，其次是 DNMT3A、TET2、ASXL1 和 TP53。与单核细胞和粒细胞相比，B 细胞和 T 细胞中的变异等位基因频率显着较低。 CH 不会增加 CAR T 相关毒性的风险。无论克隆大小、年龄或 CAR T 产品如何，CHpos 和 CHneg 患者中细胞因子释放综合征和免疫效应细胞相关神经毒性综合征的发生率相似。长期血细胞减少与 CH 无关。 CHpos 患者的最佳总体缓解率 (ORR) 在数值上较高，但并未显着较高（ORR 76.7% 对比 62.2%；P = 0.13）。此外，CH 状态不能预测无进展生存期或总生存期。最后，序贯分析显示 VAF 适度增加 1.3%，并在输注后 100 天内获得新突变。 CH 在接受 CAR T 细胞的大 B 细胞淋巴瘤/ALL 患者中很常见，但不影响毒性、治疗反应或结果。版权所有 © 2023 作者。由 Wolters Kluwer Health, Inc. 代表欧洲血液学协会出版。

MECOM 基因座编码的亲嗜性病毒整合位点 1 (EVI1) 是一种致癌锌指转录因子，在正常和恶性细胞中具有多种作用，在造血过程中得到最广泛的研究。 EVI1以上下文依赖性方式与其他转录因子相互作用，调节转录和染色质重塑，从而影响细胞的增殖、分化和存活。有趣的是，它既可以充当转录激活子，也可以充当转录抑制子。 EVI1在神经系统和造血等不同组织的发育过程中表达并发挥重要功能，表现出严格的时空表达模式。然而，EVI1 在多种癌症实体中经常过度表达，包括卵巢癌和胰腺癌等上皮癌，以及骨髓性白血病等血液恶性肿瘤。重要的是，EVI1 过度表达通常与非常差的临床结果和治疗抵抗相关。因此，EVI1 是一个有趣的候选者，可用于研究改善“EVI1high”造血系统恶性肿瘤高危患者的预后和治疗。版权所有 © 2023 作者。由 Wolters Kluwer Health, Inc. 代表欧洲血液学协会出版。

骨髓增生异常肿瘤 (MDS) 是一组异质性血液干细胞疾病，其特征为发育异常、血细胞减少和急性白血病风险增加。由于患者之间的预后差异很大，并且从观察到同种异体干细胞移植的治疗选择也各不相同，因此准确而精确的疾病风险预测对于决策至关重要。为此，我们检索了 90 个西班牙机构的 MDS 患者的注册数据。总共纳入 7202 名患者，分为训练组（80%）和测试组（20%）。使用机器学习技术（随机生存森林）来模拟总生存期 (OS) 和无白血病生存期 (LFS)。最佳模型基于 8 个变量（年龄、性别、血红蛋白、白细胞计数、血小板计数、中性粒细胞百分比、骨髓母细胞和细胞遗传学风险组）。该模型在预测 OS（c 指数；0.759 和 0.776）和 LFS（c 指数；0.812 和 0.845）方面实现了高精度。重要的是，该模型优于修订后的国际预后评分系统 (IPSS-R) 和年龄调整的 IPSS-R。这种差异在不同年龄范围和所有评估的疾病亚组中都持续存在。最后，我们在外部队列中验证了我们的结果，证实了 MDS 人工智能预后评分系统 (AIPSS-MDS) 相对于 IPSS-R 的优越性，并实现了与分子 IPSS 类似的性能。总之，AIPSS-MDS 评分是一种完全基于传统临床、血液学和细胞遗传学变量的新预后模型。 AIPSS-MDS 在预测 MDS 患者生存方面具有很高的预后准确性，优于其他成熟的风险评分系统。版权所有 © 2023 作者。由 Wolters Kluwer Health, Inc. 代表欧洲血液学协会出版。

激活集落刺激因子 3 受体基因 (CSF3R) 突变在伴有 t(8;21) 易位的急性髓系白血病 (AML) 中反复出现。然而，CSF3R 的改变和 t(8;21) 相关的 RUNX1-RUNX1T1 融合之间致癌协作的性质仍不清楚。在来自健康供体的 CD34 造血干细胞和祖细胞中，双癌基因表达导致克隆优势、自我更新潜力增加、原始细胞样形态和独特的免疫表型。基因表达谱揭示 Hedgehog 信号传导是一种潜在机制，而 GLI2 的上调构成了假定的药理学靶点。原代造血细胞和 t(8;21) 阳性 AML 细胞系 SKNO-1 在表达 CSF3R T618I 时均表现出对 GLI 抑制剂 GANT61 的敏感性增加。我们的研究结果表明，在白血病发生过程中，RUNX1-RUNXT1 融合和 CSF3R 突变以协同方式改变刺猬信号，可用于治疗。版权所有 © 2023 作者。由 Wolters Kluwer Health, Inc. 代表欧洲血液学协会出版。