我们使用源于小鼠白血病病毒（MLV）的逆转录病毒载体进行体细胞基因治疗应用（如对造血干细胞的遗传修饰）。最近，我们报道了建立了一种悬浮型病毒包装细胞系（VPC）用于生产MLV载体。我们利用跳跃子载体技术对人胚胎肾细胞293-F（HEK293-F）进行了基因修饰，以实现这一目的。在这里，我们展示了使用该细胞系建立连续高细胞密度（HCD）工艺。首先，我们在小尺度上比较了不同培养基在最大可达到的活细胞浓度（VCC）方面的差异。接下来，我们将这个工艺转移到搅拌槽生物反应器，并应用了增产策略。具体而言，我们建立了一种使用交替切向流过滤系统的灌流工艺。在这里，我们实现了高达27.4E + 06细胞/mL的VCC和高达8.6E + 06传导单位/mL的MLV载体滴度。最后，我们使用管式膜进行细胞滞留和连续病毒载体收获，建立了连续HCD工艺。这里，空间-时间产量比相比相应的批次培养提高了18倍。总体而言，我们的结果明确证明了高密度培养对病毒载体的高产量生产是可行的，特别是与连续病毒载体收获相结合时。关键点： • 建立了用于MLV载体生产的连续高细胞密度工艺 • 管式细胞滞留膜实现了连续载体收获 • 建立的工艺的空间-时间产量比相比批次培养提高了18倍。© 2023. 作者。

肝细胞癌（HCC）是全球第六常见的癌症和第四大导致癌症相关死亡的原因。目前，晚期或转移性HCC主要进行系统性药物治疗，但患者生存率不尽如人意。冷大气等离子体作为一种有希望的、物理化学的、广谱的抗癌疗法应运而生。在这项临床前研究中，我们研究了基于压电直接放电技术的冷等离子体，即压电冷等离子体（Piezo-CAP）对HCC的体外和体内抗肿瘤功能和机制。我们使用了多种HCC细胞系，如SMMC7721、HepG2和LM3，作为体外癌症模型，用于表型和机制研究。具体来说，我们采用了细胞计数试剂盒-8和集落形成实验、流式细胞术、转移实验、蛋白质印迹、活性氧（ROS）试剂盒和还原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽比（GSH/GSSG）试剂盒来证明等离子体诱导的HCC细胞增殖、细胞周期进展、迁移和侵袭、上皮-间质转变、细胞内ROS和抗氧化能力的变化。此外，我们还进行了吖啶橙/溴乙酸酯（AO/EB）染色和透射电子显微镜观察HCC细胞凋亡的细胞和亚细胞评估。我们使用荧光双标记的Ad-mCherry-RFP-LC3B慢病毒系统来检测自噬流。另一方面，我们采用RNA-测序、定量实时PCR和蛋白质印迹技术来证明等离子体诱导的肿瘤糖酵解和致癌增殖的代谢和分子破坏。我们使用人细胞株异种移植模型和免疫组织化学（IHC）对体内实验进行机理研究。通过抑制细胞增殖、迁移和侵袭，促进细胞凋亡和自噬，压电冷等离子体发挥了抗肿瘤功能。压电冷等离子体处理可以通过同时破坏氧化还原失衡、糖酵解途径和PI3K/AKT/mTOR/HIF1α信号通路的癌症存活途径，抑制HCC细胞的增殖并诱导细胞自噬。此外，在将这些体外结果转化为组织层面时，压电冷等离子体显著抑制了原位肿瘤生长。这些发现共同表明，压电冷等离子体通过多靶向阻断调控癌症存活途径（包括失调的氧还原平衡、糖酵解和PI3K/AKT/mTOR/HIF-1α信号通路），诱导HCC细胞的凋亡和自噬。版权所有© 2023，由爱思唯尔出版。

手术是局部晚期分化型甲状腺癌（DTC）的主要治疗方法。然而，一些局部晚期患者不适合行R0/1切除术。目前关于局部晚期DTC新辅助治疗的证据有限。舒尼替尼靶向多个激酶，在无放射碘耐药的DTC患者中具有高效、可耐受和安全的特点。此外，舒尼替尼联合托瑞帕利单抗（一种抗PD-1抗体）在晚期实体瘤中显示了令人鼓舞的抗肿瘤活性。本研究旨在评估舒尼替尼联合托瑞帕利单抗在局部晚期DTC新辅助治疗中的疗效和安全性。在这项单臂、Ⅱ期研究中，符合病理学确认的不能手术切除或边缘可手术切除的DTC患者符合入选条件，并接受每天口服250毫克舒尼替尼和每3周静脉注射240毫克托瑞帕利单抗的联合治疗。治疗持续至满意的根治性手术、疾病进展、患者撤回同意、无法接受的毒性反应或研究者判断为止。主要终点是客观缓解率（ORR）。次要终点包括R0/1切除率、不良事件（AEs）等。结果：共有10名患者入组并接受至少4个周期的治疗。ORR为60%。9名患者在新辅助治疗后接受了R0/1切除。目标病变直径总和最佳百分比变化的中位数为32%。大多数不良事件（AEs）为1级或2级。舒尼替尼联合托瑞帕利单抗作为局部晚期DTC的新辅助治疗是可行的，并且大部分患者实现了R0/1切除。它为局部晚期DTC提供了新的选择，并需要进一步研究。©2023.外科肿瘤学会。

荧光引导手术（Fluorescence-guided surgery，简称FGS）在儿科肿瘤外科学中越来越多地应用了吲哚菁绿（Indocyanine green，简称ICG）。然而，FGS在大多数文献中仅报道了在肝脏和肾脏肿瘤的病例研究。在儿科肿瘤外科学中运用新技术比成人肿瘤外科学更具挑战性，原因在于肿瘤组织学、生物学的差异以及案例较少。目前还没有关于ICG引导的FGS在儿科实体肿瘤外科手术中的一致共识。因此，我们回顾了文献并讨论了FGS的局限性和前景。根据PRISMA指南，我们分析了关于ICG引导的儿童实体肿瘤FGS的文章。我们排除了病例报告、意见文章和评论综述。在分析的108篇文章中，有17篇（14篇回顾性研究和3篇前瞻性研究）符合纳入标准。大多数研究（70.6%）使用ICG来识别肝脏肿瘤，但ICG的给药时间和剂量各不相同。手术中结果、灵敏度和特异性报告在研究中占23.5%。荧光引导的肝切除手术对90-100%的病例达到了负面边缘；肺部转移在33%的研究中被发现。在耳鼻喉恶性肿瘤中，有25%的病例报告显示有无荧光信号的阳性边缘。总的来说，ICG在淋巴结采样和保留肾单位手术中显示了有效且安全的作用。尽管FGS的结果令人鼓舞，但ICG的使用在国际儿科肿瘤外科学界存在较大差异。不完全报道手术中的成像结果以及儿童实体肿瘤的多样性和罕见性限制了ICG在儿科肿瘤外科学中的科学证据。需要进一步的国际合作研究ICG在儿科肿瘤外科学中的应用和局限性。© 2023年。外科肿瘤学会。

在进行新辅助化疗（NAC）后，术前检测病理完全缓解（pCR）有助于在手术后采用非手术治疗方法。我们开发了一种基于深度神经网络的人工智能（AI）引导的pCR评估方法，用于在手术前识别pCR。本研究对进行NAC后接受食管切除术的可切除性食管鳞状细胞癌（ESCC）患者进行了检验。根据pCR患者的数量，随机选取了同样数量的病理学反应者但没有pCR的患者和非反应者。使用深度神经网络分析内窥镜图像。使用包含20张照片的测试数据集进行验证。计算了AI和四个有经验的内窥镜医师的pCR评估的敏感性、特异性、阳性预测值（PPV）和阴性预测值（NPV）。对于病理反应评估，使用了日本食管癌分级系统。该研究纳入了123名患者，包括41名pCR患者，同样数量的没有pCR的病理学反应者和非反应者[0级，5例（4%）；1a级，36例（30%）；1b级，21例（17%）；2级，20例（16%）；3级，41例（33%）]。在20个模型中，内窥镜反应（ER）检测的敏感性、特异性、PPV、NPV和准确性的中位数值分别为60%、81%、77%、67%和70%。类似地，内窥镜医师的这些中位数分别为43%、90%、85%、65%和66%。这个概念证明研究表明，NAC后的AI引导的内窥镜反应评估能够以中等准确度识别pCR。目前的AI算法可能通过谨慎的外部验证和进行前瞻性研究来指导ESCC患者包括原发肿瘤和淋巴结在内的个体化治疗策略，以证明这种诊断方法的临床价值。© 2023年。外科肿瘤学会。

比较滤泡手术和晶体提取术对于年轻患者的医疗控制方面的闭角病房性青光眼（ACG）的效果。回顾性、非随机、对比性干预研究。我们回顾了以下情况的病例：（1）年龄≤ 40岁，（2）诊断为无白内障的闭角病房性青光眼，包括原发性闭角型青光眼（PACG），小眼闭角性青光眼和合并视网膜病变的闭角病房性青光眼，（3）进行滤泡手术或晶体提取术的闭角病房性青光眼。主要观察指标包括术后早期（1周内）和晚期（>3个月）随访时的眼内压（IOP）、药物数量、最佳矫正视力和严重并发症。共有130名年轻患者的160只眼的数据可用。其中76只PACG，12只小眼闭角性青光眼和26只合并视网膜病变的闭角病房青光眼接受了滤泡手术，而22只PACG，12只小眼闭角性青光眼和12只合并视网膜病变的闭角病房性青光眼接受了晶体提取术。总体而言，在每个ACG亚组中，滤泡手术和晶体提取术都在术后晚期显著减轻了眼内压和药物，并且两种治疗的完全成功率相似（P > . 05）。关于安全性，滤泡手术和合并视网膜病变的患者是与术后恶性青光眼相关的独立因素（在两个多变量逻辑回归模型中均为P < . 05）。本研究强调在医疗控制不佳的年轻ACG患者中，晶体提取术的疗效与滤泡手术类似，但晶体提取术更安全，尤其是对于合并视网膜病变的年轻ACG患者。版权所有©2023 Elsevier Inc.发表。

目前几乎没有证据表明人类表型的遗传基础在不同阶段存在显著差异。然而，时间相关表型的研究还不足，并且可以被视为反映潜在危险因素的表现形式，当数值范围广泛时，该因素在整个生命过程中不太可能保持恒定。在这项研究中，我们发现在英国生物库中与天然绝经年龄（ANM）有关的245个基因全幅显著相关的基因关联中，有74%显示出一种与年龄相关的效应形式。其中19个已经通过我们的建模框架得到复制性的发现，该框架能够确定DNA变异年龄发病关联的时间相关性，而不会造成显著的多重检验负担。在从早期到晚期绝经的范围内，我们发现存在明显不同的潜在生物途径，ANM与健康指标和结果之间的遗传相关性的符号变化，以及推断的因果关系的差异。我们发现，仅有DNA损伤应激反应过程会影响早期绝经的卵巢储备和消耗的情况。通过遗传学介导的ANM延迟与所有年龄组的乳腺癌和平滑肌瘤的相对风险增加以及晚期ANM女性的高胆固醇和心力衰竭相关。这些发现表明，通过适当建模大规模生物库数据，我们能够更好地理解健康指标和结果的遗传风险因素关系的年龄依赖性。版权所有©2023作者。由Elsevier Inc.发布，保留所有权利。

二硫代磷人病是一种由二硫化物应激引起的新型细胞死亡，其依赖于半胱氨酸二硫化物的积累，导致细胞毒性和细胞死亡的触发。然而，二硫代磷人病相关基因在膀胱尿路上皮癌（BLCA）中的直接预后影响和调控机制尚不清楚。为了探究10个二硫代磷人病相关基因的作用，对这10个基因的多组学数据进行了全面分析。接下来，基于七个二硫代磷人病相关的差异表达基因，开发了一个新的二硫代磷人病相关基因评分，用于帮助预测BLCA的预后。使用免疫组化、EDU、实时PCR和免疫印迹验证了该模型。高风险评分组和低风险评分组之间存在显著的功能差异，风险评分较高的样本表现出较高的恶性程度。此外，高风险评分组的肿瘤排斥和肿瘤免疫功能障碍与排斥评分都高于低风险评分组。风险评分与免疫检查点的表达呈正相关。药物敏感性分析显示，低风险评分组对顺铂、多柔比星、多西他赛和吉西他滨的敏感性高于高风险评分组。此外，TM4SF1的表达与BLCA的恶性程度呈正相关，敲除TM4SF1后，BLCA细胞的增殖能力减弱。本研究结果表明，二硫代磷人病相关基因通过参与免疫细胞浸润影响BLCA的预后。因此，这些发现表明了二硫代磷人病在BLCA中的作用及其潜在调控机制。© 2023. 作者，在Springer-Verlag GmbH Germany的独家许可下，Springer Nature的一部分。

为准确地对原位导管癌（DCIS）的自然历史进行建模和估计过度诊断率，有必要进行假设。为改进当前对过度诊断率（0-91%）的估计，本综述的目的是确定和分析在女性DCIS自然历史建模研究中所做的假设。对英文全文文章进行了系统审查，使用PubMed、Embase和Web of Science数据库，截止到2023年2月6日。两名评估员独立地进行了资格和所有评估。进行了偏倚风险和质量评估，通过共识解决了差异。使用Cohen's kappa量化了读者一致性。使用三种表格进行了数据提取，包括研究特征、模型评估和肿瘤进展。共区分了30个模型。关于DCIS的自然历史最重要的假设是新增非进展性DCIS（20-100%），将DCIS分类为三个等级，其中高等级DCIS有较高的进展为浸润性乳腺癌（IBC）的机会，以及根据年龄和等级可能出现1-4%的倒退情况。DCIS向IBC进展的其他已确认危险因素包括年龄较小、出生时期、较大的肿瘤大小和个体风险。为了准确地对DCIS的自然历史进行建模，需要考虑的因素包括DCIS等级、非进展性DCIS（9-80%）、从DCIS到无癌症的倒退率（低于10%）以及使用已确立的进展概率的风险因素（年龄）。了解研究DCIS时需要考虑的关键因素可以改善过度诊断的估计和筛查优化。版权所有 © 2023 The Authors. 由Elsevier Ltd.发表。保留所有权利。

在临终关怀中，患者报告的结果能够及早监测和管理对患者日常生活影响最大的症状；然而，在日常实践中采用电子患者报告结果测量（e-PROMs）存在几个障碍。本研究探讨了卫生保健专业人员（HCPs）在实施家庭临终关怀中患者报告结果测量的潜在障碍和促进因素的经验。本研究采用定性描述性设计。数据采集自按照Grol的概念框架组织的两个焦点小组。招募了参与米兰Fondazione IRCCS Istituto Nazionale dei Tumori家庭临终癌症护理的HCPs。数据经过反思性主题分析进行分析。共生成了245个编码，其中第一个焦点小组为171个，第二个焦点小组为74个。根据Grol的主题，结果被细分为子主题：创新、个人专业知识、患者、社会背景、组织环境，除了经济政治背景。第一个焦点小组有9名HCP参加，第二个焦点小组有10名HCP参加。根据这些参与者的观点，在实施的各个阶段，只要HCP们接受了适当的培训和支持，e-PROMs可以融入临床实践。他们在社会和组织背景方面确定了障碍，这是由于肿瘤终末期环境的独特性和难以捉摸的护理干预，同时也有很多促进因素，可以推动其中新技术的创新，并改善与患者和医疗团队的沟通。根据HCPs的观点，他们认为e-PROMs增加了患者护理和他们的工作价值；然而，仍然存在障碍，特别是与这些患者的脆弱性、技术系统的适用性、教育的缺乏以及护理低人性化的风险相关。© 2023年 BioMed Central Ltd., Spring Nature集团的一部分。