神经元特异性烯醇酶（NSE）是一种由αγ和γγ同工酶二聚体组成的有前途的小细胞肺癌（SCLC）生物标志物。由于传统的免疫测定存在干扰并且不能区分同工酶，我们开发了一种多重免疫亲和（IA）液相层析-串联质谱（LC-MS/MS）检测NSEα和NSEγ的方法，用于人类血清的定量分析。定标剂通过对重组表达的αα和γγ烯醇酶二聚体进行冷变性制备而成，诱导新的二聚体平衡态，大约为1αγ:1γγ:1αα。通过使用针对NSEγ特异性抗体进行IA萃取，实现了选择性样品纯化。所分离的αγ和γγ二聚体进行变性和胰蛋白酶消化，以便定量选定的标志性肽和其对应的同位素标记的内标准。得到的线性动态范围分别为1.5-56 ng/mL和0.64-167 ng/mL，对应于NSEα和NSEγ（R2分别为0.88和0.97）。检验结果表明，对NSEα和NSEγ的准确性和精密度均达到了可接受的水平。该方法成功地应用于患者血清中，检测到了两种同工酶。与传统的免疫测定相比，IA LC-MS/MS测得的总NSE浓度明显较低。通过这种多重IA LC-MS/MS检测方法，可以探索定量分析单个同工酶的临床价值。此外，与此处描述的定标剂一起，它可以应用于标准化不同平台的NSE免疫测定。版权所有 ©2023作者。由Elsevier B.V.发表。保留所有权利。

皮肤黑色素瘤（SKCM）早期发现率低，死亡率高。现有治疗药物存在许多副作用和药物耐受问题。目前的研究已经确认SKCM病因相关基因促进了皮肤黑色素瘤的侵袭和转移，但它们在肿瘤微环境（TME）中的作用仍不清楚。网络药理学为药物再利用和重新定位提供了新机会，是一种快速、安全、廉价的药物发现方法，可寻找用于SKCM治疗的新药物。本研究基于三个数据库（KEGG、OMIM和Genotype）获取SKCM相关基因和TCGA SKCM数据集，通过对GSE3189和GSE46517的SKCM差异基因进行交集分析，确定SKCM病因相关差异基因，并进行免疫浸润和分析，构建预后算术风险模型进行风险分层和预测，并重点关注ZC3H12A的差异表达及其对TME的影响。最后，采用蛋白质相互作用网络方法量化684个药物靶点与皮肤黑色素瘤之间的相似度，并筛选出与皮肤黑色素瘤相似的药物。基于KEGG、OMIM和Genotype三个数据库，获取了294个SKCM相关基因和18个SKCM病因相关差异基因，其中18个SKCM病因相关差异基因与TME显著相关。构建的预后算术风险模型预测表现更好，为免疫治疗提供了有价值的信息。多元Cox回归分析和K-M分析显示，ZC3H12A是影响SKCM预后的差异表达基因，促进了抗肿瘤免疫细胞CD8 ++T细胞、B细胞和DC细胞的浸润。基于蛋白质相互作用网络方法的分析发现，有43个药物在SKCM治疗中具有高潜力，这43个药物的文献搜索后，发现21个药物已被证实可用于SKCM的治疗。综上所述，与SKCM病因相关的差异基因在肿瘤免疫微环境、临床病理特征和预后中具有重要作用，特别是ZC3H12A在鉴定早期SKCM患者中具有潜在作用。同时，它为SKCM的药物开发提供了新策略，并为SKCM药物的再利用提供了依据。 ©2023. 作者授予Springer-Verlag GmbH Germany的独家许可，隶属于Springer Nature的一部分。

结外边缘区淋巴瘤(EMZL)是一种来源于边缘区B细胞并与慢性炎症有关的缀合粘膜淋巴组织的慢性淋巴瘤。根据原发结外部位的不同，EMZL表现出不同的基因组变异，但通常影响NF-κB、B细胞受体和NOTCH等信号通路。放射治疗通常用于局限性疾病的治疗，多种药物可用于需要治疗的晚期疾病患者。苯达莫司汀联合利妥昔单抗是与更高疗效相关的前线治疗方案。临床特征、诊断、基因组，模型实现风险分层、治疗选择和未来方向。 EMZL缺乏一致的基因分型概况，这妨碍了组织和循环生物标志物的开发，以用于诊断、风险分层和监测最小残留病。此外，结外部位上的生物异质性与整体基因组数据的相对有限性，阻止了针对可药物靶标的通路进行个体化治疗的测试。未来的临床试验应该侧重于EMZL，考虑到在试验资格条件和评估反应方面的独特临床特征，以更好地了解新药的疗效并勾勒出治疗顺序。

使用咪唑霉素C（MMC）处理后激活 Fanconi 贫血（FA）途径，对于防止称为“辐射状”的染色体易位至关重要。当复制叉在 MMC 诱导的链间交联（ICL）处停滞时，FA 途径被激活以协调 ICL 解开和 DNA 断裂中介修复。然而，在 FA 缺陷细胞中，ICL 相关断裂如何以导致辐射状的方式解决尚不清楚。在这里，我们证明 MMC 诱导的辐射状依赖于 DNA 聚合酶θ（POLθ）介导的替代末端结合（A-EJ）。具体而言，我们展示了在 FANCD2-/- 细胞中观察到的辐射状依赖于 POLθ 和 DNA 连接酶III，并独立于经典的非同源末端结合。此外，使用 POLθ 抑制剂处理 FANCD2-/- 细胞可消除辐射状并导致积累与常染色体易损位点共定位的断裂。总体而言，这些观察结果将 A-EJ 牵涉到辐射状的形成中，并提供了针对 FA 途径缺陷癌症治疗的 POLθ 抑制剂的机制见解。

癌细胞和内皮细胞（ECs）在肿瘤微环境中的相互作用对于肿瘤进展、复发和癌细胞干性发挥至关重要的作用。在这里，我们提供了一个方案，其中包含两种研究这种相互作用的体外方法。我们首先描述了一个间接共培养系统，以研究ECs分泌因子对癌细胞中干性标记物的调节作用。然后我们详细描述一个直接共培养系统，以研究细胞间间质通信。有关使用和执行此方案的完整详细信息，请参考Sewell-Loftin等人1和Guo等人2。版权所有©2023作者。Elsevier Inc.保留所有权利。

癌相关成纤维细胞（CAFs）是肿瘤相关基质的主要成分，对肿瘤进展和免疫抑制起重要作用。因此，精确的CAFs治疗诊断对CAFs靶向治疗非常有益。但是，能够实现精确的CAF治疗诊断的成像剂很少被利用。为了解决这个问题，我们开发了一种分子前疗法探针（FMP），具有可活化荧光、光声（PA）成像和光动力学治疗（PDT），并针对Fibroblast Activation Protein α（FAPα）进行响应，该蛋白在90％以上类型的CAFs和某些肿瘤细胞中过度表达。由于对CAFs和肿瘤细胞的高效可活化光毒性以及激活的免疫原性细胞死亡（ICD），在4T1肿瘤携带的小鼠模型中观察到原发性肿瘤的完全肿瘤消退和远处肿瘤的脱离效应。通过与PD-L1检查点阻断免疫疗法的整合，已经激发了增强的全身免疫反应，以获得原发性和远处肿瘤的长期抑制以及阻止活体小鼠的全身癌转移。本文受版权保护。版权所有。

肾细胞癌（RCC）是最常见的惡性肾脏肿瘤。它不是单一实体，而是一种涵盖几种不同肿瘤类型的大伞。最普遍和临床意义最重大的RCC亚型是透明细胞癌，由具有空细胞质的细胞组成。这些肿瘤细胞携带VHL基因的双等位基因缺失，导致假性缺氧状态，促进血管生成和细胞增殖。乳头状RCC和嫌色细胞癌也是常见的亚型之一，其中前者呈乳头状外观，拥有cMET突变。后者的特点是嗜酸性肿瘤细胞和多个染色体缺失。这些亚型占成人肾癌的90-95%。此外，也可以发现具有独特免疫组织化学特征、遗传异常或特定临床过程的罕见肿瘤亚型。目前，RCC亚型仅具有预后意义，没有任何与亚型相关的治疗方法。然而，将来可能会出现与组织学亚型相关的治疗方法，因此，应根据目前的建议进行RCC的诊断。

肿瘤化疗耐药是由复杂的过程引起的，负责约一半的所有癌症死亡。在我的论文中，我研究了多种不同的耐药机制，最深入地探究了由P-糖蛋白（Pgp）的表达和功能引起的多药耐药（MDR）的影响，以及有效针对MDR的选择性化合物（如NSC297366）。我们使用不同的Pgp表达细胞模型研究了该机制。为了寻找MDR选择性NSC297366的作用机制，我们表明其胞内铁结合螯合分子能够减少细胞内可用的游离铁量。此外，通过MDR细胞中Pgp的活性外排，这些化合物可以导致细胞内铁缺乏，促进细胞周期和凋亡等需要铁的过程的上调，从而选择性地杀死MDR癌细胞。我们的结果提出了有针对性的杀死MDR表型癌细胞的可能性，这些癌细胞对其他治疗方法产生耐药性，并与传统化疗方法结合起来，可能形成长期控制该疾病的策略基础。

我们的研究基于鸡成分化软骨细胞和健康、病理人类色素细胞的N-甲基-D-天门冬氨酸型谷氨酸受体研究。鉴于NMDAR主要介导Ca2+电流，我们侧重于Ca2+稳态的变化。实验证明，NMDAR可能在软骨祖细胞内精确调节的细胞内Ca2+振荡中发挥作用，并且NMDAR诱导的Ca2+信号与最佳软骨发生关联。在涉及亚细胞分数的黑色素瘤细胞中的NMDAR亚基蛋白表达情况揭示了黑色素细胞和黑色素瘤细胞之间的重大差异，后者可能存在功能核NMDAR。总之，我们首次在非神经系统外的非可兴奋细胞中，通过体外实验证明了功能性NMDAR的存在（在成分化软骨细胞中），以及NMDAR的核定位（在黑色素瘤细胞中）。前者介导了在软骨发生中不可或缺的Ca2+-依赖性途径，而后者可能是由于恶性转化而形成的。

研究FAM72对口腔鳞状细胞癌（OSCC）患者预后的影响，探索FAM72与OSCC之间的关系。我们使用了大量数据库和分析工具，评估FAM72与OSCC之间的关系，包括癌症基因组图谱（TCGA）、Metascape和MethSurv。我们通过实时定量聚合酶链反应（RT-qPCR）对OSCC细胞系和组织进行了初步验证。FAM72在OSCC中的表达高于正常组织。单因素Cox数据分析表明，OSCC中FAM72A、FAM72B和FAM72C的表达升高与整体生存率不良有关。此外，FAM72B和FAM72C在多因素Cox回归中独立于整体生存率。通过Gene Ontology (GO)对Metascape中的FAM72A至FAM72D及其共表达基因进行了分析，发现它们富集在细胞周期、有丝分裂和DNA代谢等方面。基因集富集分析（GSEA）显示富集了与细胞代谢相关的通路。此外，高FAM72表达与OSCC患者不良预后有关。FAM72A至FAM72D与OSCC患者肿瘤免疫细胞浸润相关。我们发现甲基化水平可能与OSCC患者的预后有关。我们使用RT-qPCR确定了FAM72B和FAM72C在OSCC癌组织、癌旁组织、人正常口腔角质细胞（HOK）和人舌鳞状细胞癌（Cal-33）中的差异表达水平。我们的研究表明，FAM72B和FAM72C是OSCC不良预后的潜在分子标记，可作为OSCC治疗策略的新靶点。版权所有 © 2023 Elsevier Ltd.