β- 和γ- 疱疹病毒以一种与宿主转录不同的方式转录其后期基因。这一过程由病毒转录激活蛋白复合物指导，该复合物劫持了细胞RNA聚合酶II和一些未知的额外因子。我们使用近距离标记结合质谱，以及CRISPR和siRNA筛选来鉴定与Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus (KSHV)后期基因转录复合物功能相关的蛋白质。这些数据揭示，病毒DNA包装马达的催化亚单位，ORF29，既与病毒转录激活复合物动态相关，又能加强后期基因表达。通过基因突变和ORF29的删除，我们证明其催化活性加强了病毒转录并且在感染过程中对必要的后期蛋白质的大量积累是必要的。因此，我们提出ORF29的扩展作用，包括其在病毒包装中已经确定的功能以及在KSHV病毒转录和后期基因表达方面的新发现的贡献。版权所有：© 2023 McCollum等人。这是一篇开放获取文章，遵守创作共用许可证，允许在任何媒介中无限制使用、转载和再制，前提是原作者和来源进行了标注。

美国的健康支出增长和多病症流行之间存在联系，但尚不为人们所理解。多病症被认为对个人的健康支出有影响，但如何拥有一种特定的额外患病对支出的影响尚不确定。此外，大多数单病症支出估算的研究很少考虑到多病症的影响。准确估算每种疾病和不同组合所涉及的支出，可以帮助决策者更有效地制定预防政策，减少国民健康支出。本研究从两个不同的角度探讨多病症和支出之间的关系：第一，量化不同疾病组合的支出；第二，评估在考虑多病症贡献的情况下单种疾病的支出发生变化（即，在其他慢性病同时存在时附加/减少的支出）。我们使用了Truven Health MarketScan Research数据库中私人索赔的数据，其中包括来自美国的1628,894名18至64岁独立的受保者，以及他们在2018年的年度住院和门诊诊断和支出。我们选择的疾病具有在全球疾病负担病因中的平均持续时间大于一年的特征。我们使用了带有随机梯度下降方法的惩罚线性回归来评估支出和多病症之间的关系，其中包括所有可能的两个或三个不同病症的疾病组合（二元组和三元组），以及每种疾病在考虑多病症后的支出。我们通过组合类型（单一、二元组和三元组）和多病症疾病类别，分解了多病症调整后的支出变化。我们定义了63种慢性病，发现56.2%的研究人口患有至少两种慢性病。大约60.1%的疾病组合具有超加性支出（例如，该组合的支出显著高于单个疾病的总和），15.7%具有加性支出，23.6%具有亚加性支出（例如，该组合的支出显著低于单个疾病的总和）。具有高估支出的相对频繁的疾病组合（更高的观察流行率）包括内分泌、代谢、血液和免疫系统疾病（EMBI疾病）、慢性肾病、贫血和血液癌症。在考虑多病症调整后的单种疾病支出方面，下列疾病的治疗费用在高方面，且观察流行率较高：慢性肾脏疾病（14,376美元[12,291至16,670美元]）、肝硬化（6,465美元[6,090至6,930美元]）、缺血性心脏病（IHD）相关心脏疾病（6,029美元[5,529至6,529美元]）和炎症性肠病（4,697美元[4,594至4,813美元]）。与未调整的单病症支出估算相比，有50种疾病在考虑到多病症后支出更高，7种疾病的差异不到5%，6种疾病调整后的支出更低。我们一直发现慢性肾脏疾病和IHD与治疗病例的高支出、高观察流行率有关，并且与其他慢性病共同存在时对支出做出了最大的贡献。在全球健康支出和尤其是美国的不断上升中，明确高流行、高支出条件和疾病组合（特别是与更大的超加性支出相关的条件）可能有助于政策制定者、保险公司和服务提供商优先考虑优先治疗并减少支出。版权所有： © 2023 Chang等。本文是一篇开放获取文章，分发在知识共享许可证下，只要原作者和出处得到适当的认可，任何人都可以无限制地使用、分发和复制这篇文章。

目前对于使用抗PD-1治疗患有黑色素瘤的患者在5年之后的长期疗效了解甚少，尤其是那些不在临床试验中接受治疗的患者。本回顾性队列研究选取了2014年至2017年期间在Memorial Sloan Kettering癌症中心接受抗PD-1治疗的无法切除的III/IV期非视网膜型黑色素瘤患者，并至少在首个抗PD-1剂使用5年后存活了5年以上的患者（N=139）。我们对包括总体生存率（OS）、黑色素瘤特异性生存率（MSS）估计、治疗期间无需治疗幸存率和随后的治疗方案进行了表征。在5年以上幸存者（N=125）中，中位随访时间为78.4个月（范围为60.0-96.3个月）。第7年（5年里程碑后2年）的OS为90.1%（95% CI：83.0%-94.3%）。共发生14例死亡事件，其中7例由于黑色素瘤。第7年（5年里程碑后2年）的MSS为95.0%（95% CI：33.5%-95.2%）。在5年里无需随后治疗而完成抗PD-1基础治疗的患者中（N=80），不需要额外治疗的概率为95.7%（95% CI：91.0%-100%）。对于那些接受非临床试验抗PD-1治疗并且能够在初始抗PD-1治疗后至少存活5年的患者（尤其是在前5年中无需进行额外黑色素瘤治疗的患者），可以放心其长期治疗效果良好。© 2023 John Wiley＆Sons A / S。 由John Wiley＆Sons Ltd发表。

大肠癌（CRC）是全球人类所面临严重疾病之一。高度活化的“刺猬”信号在CRC的发病中扮演着极为重要的角色。植物化学物质黄连碱对CRC具有很强的抑制作用，其分子机制尚不清楚。我们旨在研究黄连碱抗CRC的作用并在“刺猬”信号瀑布级联中探讨其潜在机理。我们测试了经过黄连碱处理的CRC HCT116和SW480细胞的增殖、迁移、浸润、克隆形成、细胞凋亡和细胞周期，并测量了“刺猬”信号通路的活性。在建立的HCT116异种移植瘤小鼠模型中，评估了黄连碱对CRC的发生、病理表现和恶性表型的功效，分析了HCT116异种移植瘤组织中的“刺猬”信号轴。此外，我们还对斑马鱼进行了黄连碱的毒理学研究。研究结果表明，黄连碱可抑制HCT116和SW480细胞的增殖、迁移、浸润和克隆形成等功能。此外，它还引起了细胞凋亡，阻滞了CRC细胞在G0/G1时期的细胞周期，并减弱“刺猬”信号的级联反应。在裸鼠的HCT116异种移植瘤中，黄连碱抑制了肿瘤的生长，缓解了病理评分，并促进了肿瘤组织的细胞凋亡和细胞周期阻滞，通过压制“刺猬”信号的级联反应实现。黄连碱在斑马鱼上的毒理学研究表明，高剂量和长期使用黄连碱可能会损害鱼肝和心脏。总之，黄连碱可以通过降低“刺猬”信号的级联反应来抑制CRC的恶性表型。但需要注意的是，滥用黄连碱可能会带来潜在的不良反应。© 2023 Elsevier GmbH保留所有权利。

中药植物圆叶紫胆(Celastrus orbiculatus Thunb.)在中国已广泛使用了数千年，其茎的乙酸乙酯提取物(Celastrus orbiculatus Thunb. Extract, COE)在多个临床前研究中被报告具有抗肿瘤和抗炎作用。但COE对非小细胞肺癌(NSCLC)的抗癌活性及其潜在机制尚未完全了解。本研究旨在探究COE在NSCLC细胞上的抗肿瘤效应，并从Hippo信号通路、YAP核转位及活性氧(ROS)生成角度探讨其分子机制。通过CCK-8、克隆形成、流式细胞术和β-半乳糖苷酶染色等测定，确定COE对NSCLC细胞系增殖、细胞周期、凋亡、干性和衰老的影响。通过Western blotting研究COE对Hippo信号通路的影响。采用免疫荧光检测分析YAP在细胞内的表达和分布，采用DCFH-DA探针结合流式细胞术检测COE处理后NSCLC细胞内总ROS水平。建立异种移植肿瘤模型，并采用动物活体成像系统分析COE对Hippo-YAP信号通路在体内的影响。本研究表明COE能够显著抑制NSCLC的活性，主要通过抑制增殖、细胞周期阻滞、促进凋亡、促进衰老以及降低干性。COE能够强烈激活Hippo信号通路，抑制YAP表达和核保留。COE激活的Hippo信号通路与ROS介导的MOB1磷酸化有关。本研究揭示了COE通过激活Hippo信号通路和抑制YAP核转位来抑制NSCLC，其中ROS可能在MOB1蛋白的磷酸化中发挥作用。版权所有 ©2023 Elsevier GmbH出版。

蒙古黄芪是一种传统中药，广泛用于治疗气虚、病毒或细菌感染、炎症和癌症。其中，蒙古黄芪中的一种重要活性成分——黄芪苷IV（AST）已被证明能通过抑制氧化应激和炎症的发生来减缓疾病进展。然而，AST在改善氧化应激方面的具体靶点和作用机制仍不清楚。 本研究旨在探讨AST改善氧化应激的靶点和机制，并阐明氧化应激的生物过程。研究设计了AST功能探针来捕获靶蛋白，并与蛋白质谱结合分析靶蛋白。使用小分子和蛋白质相互作用技术验证作用模式，使用计算机动力学模拟技术分析与靶蛋白的相互作用位点。在LPS诱导的急性肺损伤小鼠模型中评估AST改善氧化应激的药理活性。此外，使用药理学和分子生物学方法探索其作用机制。 研究发现，AST通过靶向PRDX6中的PLA2催化三元袋来抑制PLA2活性。这种结合改变了PRDX6的构象和结构稳定性，并干扰了PRDX6与RAC之间的相互作用，从而阻碍了RAC-GDI异二聚体的激活。RAC的失活防止了NOX2的成熟，减轻了超氧阴离子的产生，并改善了氧化应激损伤。 本研究结果表明，AST通过作用于PRDX6的催化三元袋来阻碍PLA2活性。这进而破坏了PRDX6与RAC之间的相互作用，从而阻碍了NOX2的成熟，减轻了氧化应激损伤。版权所有©2023 Elsevier GmbH出版。

肝窦内皮细胞（LSECs）是肝脏门户，它们的病理性血管生成通过影响肝组织修复和炎症驱动在肝纤维化的发病机制中扮演着积极的角色。虽然干预血管生成可以有效抑制LSEC的异常激活，但尚未发现有效的药物治疗肝纤维化。我们研究了天然化合物Curcumol对LSEC血管生成的影响，并阐明了其新颖的潜在机制，期望为探索治疗肝纤维化的潜在药物提供科学依据。我们使用各种细胞和分子生物学方法以及基因分析技术检测培养的大鼠LSEC和小鼠肝纤维化模型中的病理性血管生成和糖酵解水平的变化。转录因子KLF5能够通过调节糖酵解过程影响LSEC的血管生成特性，并通过转录结合其启动子影响LDH-A的表达。在我们的研究中，我们惊奇地发现LDH-A（糖酵解的最终步骤）对LSEC的糖酵解过程具有强烈的调节作用。通过深入研究，我们发现LDH-A可以影响KLF5的转录活性，从而形成一个正反馈环路。Curcumol可以打破这个正反馈环路，抑制LSEC的糖酵解依赖性血管生成特性，从而缓解肝纤维化。Curcumol减少了细胞外基质（ECM）沉积，减弱了LSEC的病理性血管生成，并降低了CCl4诱导小鼠肝纤维化的水平。我们的研究结果展示了KLF5在肝纤维化中的巨大应用价值，还揭示了LDH-A通过施加非酶作用来调节糖酵解过程并形成恶性反馈环路的创新性发现。它还揭示了Curcumol调节KLF5/LDH-A正反馈环路治疗肝纤维化的前景，为未来的肝纤维化医学提供了一个新的选择。版权所有© 2023 Elsevier GmbH出版。

T52是从中国传统草药方块玉叶兰中提取出的一种甾体皂苷，据报道，它具有强烈的抗人咽喉癌细胞增殖能力。然而，T52是否具有抗骨肉瘤的特性及其潜在机制仍然未知。为了研究T52在骨肉瘤中的结果和潜在机制，我们使用CCK-8、集落形成、EdU染色、细胞周期/凋亡和细胞迁移/入侵实验来检查T52在骨肉瘤细胞中的生理作用。通过生物信息学预测评估T52与骨肉瘤相关的目标，并通过分子对接分析结合位点。进行西方印迹分析，检查与凋亡、细胞周期和STAT3信号通路激活相关的因子水平。T52在体外以剂量依赖的方式明显降低了骨肉瘤细胞的增殖、迁移和侵袭，并促进了G2/M阻滞和凋亡。在机理上，分子对接预测T52与STAT3 Src同源2（SH2）领域残基稳定结合。西方印迹显示，T52抑制了STAT3信号通路并减少了下游目标的表达，例如Bcl-2、Cyclin D1和c-Myc。此外，通过STAT3重新激活部分逆转T52的抗骨肉瘤性质，证实STAT3信号通路对调节T52的抗骨肉瘤性质至关重要。我们首次证明了T52在体外具有强大的抗骨肉瘤特性，这是通过抑制STAT3信号通路实现的。我们的发现为使用T52治疗骨肉瘤提供了药理支持，版权所有©2023 Elsevier GmbH发表。

1. 泡参皂苷（PNS）是泡参的主要活性成分，可促进血管微循环。PNS在各种癌症中表现出抗肿瘤作用。然而，PNS与肿瘤血管之间关系的分子基础仍不清楚。 2. 为了研究PNS抑制乳腺癌生长和转移以及促进血管正常化之间的关系，我们在转基因小鼠模型MMTV-PyMT（FVB）自发性乳腺癌中进行了肿瘤微血管的激光散斑成像，观察了PNS对肿瘤生长和转移的影响。进行了肿瘤的Ki67和CD31的免疫组织化学染色，扫描电子显微镜用于观察肿瘤血管形态，流式细胞术用于检测肿瘤组织免疫微环境（TME）。 对小鼠肿瘤组织的主要血管进行了RNA-seq分析。在体外培养了HUVECs，以模拟肿瘤微环境并验证测序差异关键基因。 3. 经PNS处理后，我们观察到肿瘤生长受到了抑制，小鼠系统性肿瘤微血管的血流灌注增加，肺转移数量减少。此外，原发肿瘤的血管密度增加，血管外皮更加平滑和平整。此外，肿瘤微环境中的肿瘤相关巨噬细胞数量减少，肿瘤组织中的IL-6，IL-10和TNF-α表达水平也减少。 PNS下调了与肿瘤血管生成、迁移和黏附相关的多个基因的表达。在体外的管状结构实验中，我们发现PNS通过抑制EphA2的表达，促进了肿瘤血管的形成和连接，主要是规范化管道形态。此外，PNS在体内抑制了肿瘤血管标记蛋白和血管迁移粘附相关蛋白的表达。 4. 在这项研究中，我们发现PNS促进了肿瘤血管内皮细胞的生成和连接，揭示了EphA2在内皮细胞黏附和肿瘤血管形态中的关键作用。PNS可以通过抑制EphA2、改善乳腺癌的免疫微环境和促进肿瘤血管的正常化来抑制乳腺癌的增殖和转移。版权所有©2023 Elsevier GmbH发表。

目前治疗肺癌的方法存在其弊端，例如严重的不良反应。因此，需要更安全和有效的药物。复正康爱（FZKA简称）在中国用作非小细胞肺癌晚期患者的辅助治疗已经数十年，并显示出明显的疗效和最小毒性。然而，其基本机制尚未确定。本研究通过体内外实验，以确定FZKA抑制非小细胞肺癌细胞增殖的确切机制。MTT和CCK-8实验用于检测细胞活力，异体移植模型用于体内实验。环状RNA和miRNA测序分别用于发现差异表达的环状RNA和miRNA。qRT-PCR用于检查环状RNA，miRNA和mRNA的表达水平。BaseScope用于观察环状RNA在位的表达。使用Actinomycin D和RNase R实验来展示环状RNA的稳定性。核-细胞浆分离和FISH用于鉴定环状RNA和miRNA的定位。用于展示环状RNA，miRNA和靶蛋白的结合能力的拉取，RIP和荧光素酶活性实验已经完成。流式细胞术用于观察细胞凋亡。Western blot和IHC用于检测蛋白质表达。使用TCGA数据库分析生存率。FZKA在体内外抑制非小细胞肺癌细胞增殖。经过FZKA治疗后，hsa_circ_0048091和hsa-miR-378g是最不同表达的环状RNA和miRNA。沉默hsa_circ_0048091和过表达hsa-miR-378g分别促进细胞增殖并逆转FZKA对非小细胞肺癌的抑制作用。hsa-miR-378g被hsa_circ_0048091海绵和过表达miR-378g逆转了hsa_circ_0048091对非小细胞肺癌的抑制作用。ARRDC3作为hsa-miR-378g的靶标在经过FZKA治疗后增加。沉默ARRDC3逆转了FZKA和miR-378g抑制非小细胞肺癌的作用。该研究首次确定了hsa_circ_0048091，hsa-miR-378g和ARRDC3在肺癌中的作用，并显示FZKA通过hsa_circ_0048091 / hsa-miR-378g / ARRDC3途径抑制非小细胞肺癌细胞增殖，揭示了FZKA控制人类非小细胞肺癌细胞生长的新机制。版权所有©2023 The Authors。由Elsevier GmbH出版。保留所有权利。