我们旨在研究间充质干细胞分泌物和甲氨蝶呤的组合对神经母细胞瘤细胞的5-羟色胺2A（5-HT2AR）、5-羟色胺7（5-HT7R）、腺苷2A（A2AR）受体以及CD73等生物特征的影响。甲氨蝶呤作为神经母细胞瘤细胞的血清素拮抗剂。我们使用人牙髓来源的干细胞（hDPSCs）来获取条件培养基（CM）。将甲氨蝶呤药物制备在CM中并应用于神经母细胞瘤细胞。通过Western blot和免疫荧光染色分析5-HT7R、5-HT2AR、A2AR和CD73的表达。根据产品程序使用生物活性测试试剂盒进行总的细胞凋亡、线粒体膜去极化、Ki-67增殖试验、细胞活力分析、DNA损伤和细胞周期分析。我们的结果表明，神经母细胞瘤癌细胞通常位于血清素7受体和腺苷2A受体的Gs信号轴上。CM和甲氨蝶呤抑制了神经母细胞瘤细胞中的5-HT7和A2A受体水平。我们发现，CM和甲氨蝶呤形成了5-HT2AR、5-HT7R、A2AR和CD73之间的交叉抑制作用。CM和甲氨蝶呤增加了神经母细胞瘤细胞的总凋亡率，并诱导了线粒体膜去极化。CM和甲氨蝶呤诱导了DNA损伤，并使神经母细胞瘤细胞在G0/G1期阻滞。这些结果表明，CM和甲氨蝶呤的组合可能对神经母细胞瘤癌细胞产生治疗效果，未来的体内研究对支持这些发现在神经母细胞瘤研究领域中可能是重要的。版权所有©2023 Elsevier B.V. 发表。

造血干细胞（HSCs）和白血病干细胞（LSCs）具有强大的自我更新潜力，分别负责维持正常和恶性造血。尽管已经做出了相当努力探索HSC和LSC维持的调节，但其潜在的分子机制仍然不清楚。在这里，我们观察到，刘氏杂交瘤细胞-表达，正选择相关1（Tespa1）的表达在HSC在应激暴露后显著增加。值得注意的是，由于休息不良，Tespa1删除导致小鼠在应激条件下HSC短期扩张但长期筋疲力尽。机械上，Tespa1可以与CSN子单位6（CSN6）相互作用，CSN6是COP9信号体的一个子单位，以防止HSC中c-Myc蛋白通过泛素化介导降解。因此，强迫c-Myc表达可以改善Tespa1零HSC的功能缺陷。另一方面，Tespa1被发现在人急性髓系白血病（AML）细胞中高度富集，对AML细胞的生长至关重要。此外，使用MLL-AF9诱导的AML模型，我们发现Tespa1缺乏抑制了白血病发生和LSC维持。总之，我们的发现揭示了Tespa1在促进HSC和LSC维持中的重要作用，因此提供了造血再生和AML治疗的新见解。©2023年作者。

骨肉瘤（OS）是最常见的恶性骨肿瘤，儿童和青少年的发病率较高。肿瘤的频繁转移和术后复发是OS最常见的挑战。然而，其详细机制仍然不为人知。我们通过免疫组化（IHC）染色检查了OS组织芯片中CD248的表达，并研究了CD248在OS细胞增殖、侵袭和迁移中的生物学功能，包括CCK8实验、Transwell和伤口愈合实验等。我们还研究了其在OS转移中的功能。最后，我们使用RNA-seq、Western blot、免疫荧光染色和共同免疫沉淀，利用CD248敲除OS细胞，探索了CD248如何促进OS转移的潜在机制。CD248在OS组织中高度表达，其高表达与OS的肺转移有关。CD248在OS细胞中的敲除明显抑制了细胞迁移、侵袭和转移，而对细胞增殖没有明显影响。当CD248被敲除时，裸鼠的肺转移明显受到抑制。从机制上讲，我们发现CD248可以促进ITGB1与细胞外基质（ECM）蛋白如CYR61和FN之间的相互作用，从而激活FAK-paxillin通路，促进成像焦点的形成和OS的转移。我们的数据表明，高CD248表达与OS的转移潜力相关联。CD248可能通过增强ITGB1与某些ECM蛋白之间的相互作用来促进迁移和转移。因此，CD248是转移性OS的诊断潜在标志物和有效靶点。 ©2023年，作者。

Septins是具有形成细丝能力的细胞骨架蛋白，其在细胞分裂、细胞极性、形态发生和膜转运过程中发挥多重作用。反对septin-5的自身抗体与非肿瘤性小脑失调有关，而反对septin-7的自身抗体与突出的神经精神症状的脑病有关。在这里，我们报告了在患有旁肿瘤性小脑失调的患者中新识别的反对septin-3的自身抗体。我们还提出了一种反septin自身抗体测定的策略。来自三名在小脑和海马区切片上产生相似免疫荧光染色模式的患者的血清经免疫沉淀后进行质谱分析。所鉴定的候选抗原均为septin，在HEK293细胞中单独、复合或缺少单个septin的组合中进行了重组细胞间接免疫荧光试验（RC-IIFA）。通过组织IIFA中和实验证实了对septin-3的特异性。最后，肿瘤组织切片通过免疫组化分析septin-3的表达。用大鼠小脑溶液进行免疫沉淀表明，septin-3、-5、-6、-7和-11是候选的靶抗原。所有三名患者的血清与共表达septin-3/5/6/7/11的重组细胞反应，而149份健康对照血清则没有类似的反应。在RC-IIFAs中，患者血清仅识别单独表达septin-3和复合体中的septin-3的细胞。用五种不同的缺少其中一个septin的septin组合物对患者血清进行孵育，证实了自身抗体对septin-3的特异性。患者血清的组织IIFA反应通过预先孵育septin-3/5/6/7/11复合体或单独的septin-3重组细胞溶液消除，但未在过表达septin-5的HEK293细胞溶液中消除。所有三名患者均有癌症（2个黑色素瘤，1个小细胞肺癌），表现为进行性小脑综合征，并对免疫治疗反应不良。从一名患者的切除肿瘤组织中证实了septin-3的表达。Septin-3是旁肿瘤性小脑综合征患者中的一种新型自身抗体靶标。根据我们的发现，HEK293重组细胞表达septin-3/5/6/7/11复合体的RC-IIFA可以作为筛查工具，用于研究在神经元组织切片上具有特征性染色模式的血清中的抗septin自身抗体。然后可以通过表达单个septin的RC-IIFA来确认反对单个septin的自身抗体。 © 2023. The Author(s)。

肝是重要的免疫器官，肝炎是非酒精性脂肪性肝病病理生理的一部分，这种情况可能会促进肝硬化、肝癌、肝衰竭和心血管疾病的发生。虽然肝脏实质神经密集，但我们很少了解肝脏功能在炎症中的神经调节。在这里，我们研究迷走神经对急性炎症下肝脏响应的控制。雄性C57BL/6J小鼠接受假手术、手术迷走神经或电刺激迷走神经，然后经腹腔注射TLR2激动剂酵母壁多糖。动物在注射后12小时安乐死并收集组织。样本通过qPCR、RNAseq、流式细胞术或ELISA分析。在接受迷走神经切断手术的小鼠中，肝脏炎症介质Ccl2、Il-1β和Tnf-α的mRNA水平明显高于接受假手术的小鼠。治疗组之间Ccl2水平的差异在大多数情况下都反映在血浆趋化因子CCL2的浓度上。相应地，我们观察到流式细胞术测得的腹腔巨噬细胞数量在接受迷走神经切断手术的小鼠中比接受假手术的小鼠要高。在接受电刺激迷走神经的小鼠中，Ccl2、Il1β和Tnf-α的肝脏mRNA水平以及血浆CCL2水平明显低于接受假手术的小鼠。有趣的是，RNAseq显示了肝星状细胞（HSC）的重要活化标记物Pnpla3是迷走神经切断组和假手术组之间最显着的差异表达基因。值得注意的是，脂肪肝引起的多个HSC激活相关转录本在迷走神经切断组中更高，这表明迷走神经信号有助于HSC激活。支持这一点的是，我们观察到流式细胞术测得的激活HSC数量在接受迷走神经切断手术的小鼠中比接受假手术的小鼠要高。颈部迷走神经信号控制了酵母壁多糖诱导的腹膜炎下肝脏炎症和HSC活化标志物。© 2023. 作者。

HER2-low在部分三阴性乳腺癌（TNBC）患者中可以发现。然而，其对TNBC的临床特征和肿瘤生物学特征的潜在影响仍不明确。我们回顾性纳入了251名连续TNBC患者，包括157名HER2低表达（HER2low）和94名HER2阴性（HER2neg）患者，以研究其临床和预后特征。然后，我们前瞻性地对另外七个TNBC样本进行了单细胞RNA测序（scRNA-seq）分析（HER2neg vs. HER2low，4 vs. 3），以进一步探索两种TNBC表型之间的肿瘤生物学特征差异。并进一步探讨了其潜在的分子差异性，并在其他TNBC样本中进行验证。与HER2neg TNBC相比，HER2low TNBC患者表现出更恶性的临床特征，包括更大的肿瘤大小（P = 0.04），更多的淋巴结涉及（P = 0.02），更高的病理分级（P < 0.001），更高的Ki67状态表达（P < 0.01）和更差的预后（P < 0.001; HR [CI 95%] = 3.44 [2.10-5.62]）。Cox比例风险分析显示，新辅助系统治疗、淋巴结涉及和Ki67水平是HER2low TNBC患者的预后因素，而不是HER2neg TNBC患者。scRNA-seq揭示了HER2low TNBC表现出更多代谢活跃和侵略性标志物，而HER2neg TNBC则表现出更多免疫活动相关的标志物（如免疫球蛋白相关基因IGHG1、IGHG4、IGKC、IGLC2的更高表达）；这在临床TNBC样本中通过免疫荧光法进一步得到了证实。此外，HER2low和HER2neg TNBC表现出不同的肿瘤进化特征。此外，HER2neg TNBC显示出潜在更活跃的免疫微环境，如正活跃的巨噬细胞极化调节、富含CD8+效应T细胞、T细胞受体的丰富多样性和更高水平的免疫治疗靶向标志物，这有助于实现免疫治疗反应。本研究表明，HER2low TNBC患者具有比HER2neg TNBC表型更恶性的临床特征和侵袭性肿瘤生物学特征。 HER2的异质性可能是TNBC患者临床管理中不可忽视的因素。我们的数据为开发更精细的分类和个性化治疗TNBC患者的策略提供了新的见解。© 2023. 作者

为了探索AVPR2在头颈鳞状细胞癌（HNSCC）免疫治疗中的潜力，从而为新型抗肿瘤策略提供见解。在本研究中，我们利用来自癌症基因组图谱和基因表达数据库的公共数据集对HNSCC中的AVPR2基因进行了全面的分析。我们从基因表达、预后、免疫亚型和免疫浸润等方面探讨了HNSCC的潜在分子机制。相比正常组织，原发性HNSCC组织中的AVPR2表达显著下调。高AVPR2表达的HNSCC患者预后更好。此外，GSEA的结果显示，免疫亚型表面AVPR2参与了免疫调节。此外，在HNSCC中AVPR2表达与浸润免疫细胞之间存在显著强的相关性，且浸润免疫细胞的标记基因与HNSCC中的AVPR2表达也显著相关。这些结果表明，AVPR2表达可以影响肿瘤免疫细胞的浸润。最后，我们发现只有高水平的B细胞浸润，而不是其他免疫细胞的浸润，可以预测HNSCC患者的更长总体生存率。未来的研究需要探讨AVPR2和肿瘤浸润B细胞在HNSCC中的作用。AVPR2基因可能是HNSCC的预后生物标志物。此外，AVPR2可能在HNSCC免疫调节中发挥作用，并且AVPR2通过调节肿瘤浸润的B细胞可能是一个关键的环节。©2023年。作者。

瓦特乳头癌（ampullary cancers，ACs）占所有胃肠肿瘤的不到1％。ACs通常在晚期被诊断出来，预后不良，治疗选择有限。在ACs中发现BRCA2突变的比例高达14％，与其他肿瘤类型不同，治疗方案仍需要定义。在此，我们报告了一位转移性AC患者的临床案例，其BRCA2生殖系突变的发现推动了个性化的多模态方法，具有治愈意图。一名42岁的女性被诊断为IV期BRCA2生殖系突变AC，接受了铂类首线治疗，实现了重要的肿瘤反应，但也出现了威胁生命的毒性反应。基于此，以及分子学结果和可用系统性治疗选择的预期低影响，患者接受了原发肿瘤和转移病灶的根治性完全手术切除。在经历孤立的腹膜后淋巴结复发后，考虑到BRCA2突变癌症在放疗方面的预期敏感性更高，患者接受了影像引导下的放疗，导致长时间的完全肿瘤缓解。经过两年多，该疾病仍无法在影像学和生化学上检测到。患者参加了BRCA2生殖系突变携带者的专门筛查计划，并接受了预防性双侧卵巢切除。即使考虑到单个临床报告的内在限制，我们建议应考虑在ACs中发现BRCA生殖系突变的情况，以及其他临床变量，因为它们与可能伴有增强毒性的细胞毒化疗有显著的反应关联。因此，BRCA1/2突变可能提供进一步个性化治疗的机会，超越PARP抑制剂，选择具有治愈意图的多模态方法。 © 2023年。作者（们）。

哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1（mTORC1）通过感知不同环境信号，包括氨基酸，是代谢和细胞生长的中央调节因子。 GATOR2复合物是将氨基酸信号与mTORC1联系在一起的关键组成部分。在这里，我们将蛋白质精氨酸甲基转移酶1（PRMT1）确定为GATOR2的关键调节因子。在氨基酸的作用下，细胞周期依赖性激酶5（CDK5）在S307处磷酸化PRMT1以促进PRMT1从细胞核移动至细胞质和溶酶体，进而甲基化GATOR2的关键组成部分WDR24，从而激活mTORC1通路。破坏CDK5-PRMT1-WDR24轴可抑制肝细胞癌（HCC）细胞增殖和异种移植瘤生长。高PRMT1蛋白表达与HCC患者中升高的mTORC1信号相关。因此，我们的研究解析了一种磷酸化和精氨酸甲基化依赖的mTORC1激活和肿瘤生长的调节机制，并为靶向这条通路进行癌症治疗提供了分子基础。版权所有© 2023作者。由爱思唯尔公司出版。保留所有权利。

犬体肥大细胞瘤（MCTs）约占所有犬皮肤肿瘤的21％。尽管存在全面的分级系统，但有时很难预测生物学侵袭性，因此需要更好的预后标志物。各种癌症的进展涉及DNA高甲基化，低甲基化和表观遗传酶失调。因此，全球水平的5-甲基胞嘧啶，5-羟甲基胞嘧啶和相关的酶DNMT1以及IDH1表达可能预测MCT的侵袭性。一个由244个不同肿瘤样本的核心组成的组织微阵列（TMA）来自189只狗，它们被免疫标记并用于量化全球DNA甲基化和羟甲基化水平以及DNA甲基化涉及的酶的水平及其与犬MCT结果的关系。从免疫标记的TMA中，使用QuPath（v0.1.2）生成H分数，并与相关患者数据一起分析。在所有犬MCT病例中，高5MC和DNMT1以及低IDH1水平与较差的预后相关。高5MC水平显示皮下病例疾病无瘤期短的重要性，高5MC水平显示在Kiupel分级系统高级别病例中DFI和总生存率较差。在Patnaik分级系统中，II级病例DNMT1水平低的DFI更好，5MC和5HMC水平低的OS更好。对于接受手术外辅助疗法的病例，除IDH1外的所有参数都与OS显着相关。因此，DNA甲基化状态和与DNA甲基化途径相关的酶的水平有潜力更好地预测犬MCT的预后，并可能影响治疗决策。版权所有：©2023 Syed等。这是根据知识共享署名许可的开放获取文章，允许在任何媒介上自由使用，分发和复制，前提是原始作者和来源得到良好的归属。