许多生物标志物被提出来预测对抗程序性细胞死亡蛋白1 (PD-1) /抗程序性死亡配体1 (PD-L1) 检查点抑制剂 (CPI) 的反应。然而，冲突的观察结果和缺乏一致性需要对其在大规模数据集中进行临床效用评估。我们使用临床试验和实际数据的组合数据集，评估了生物标志物对非小细胞肺癌 (NSCLC) 中 CPI 的临床结果的预测和预后效用。回顾性队列研究使用从电子健康记录中选择的24,152名患者，这些患者是从71,850名晚期 NSCLC 患者中选择出来的，以及9个罗氏阿替麦注射试验。患者被分为高和低生物标志物组。研究不同生物标志物组的治疗结果的相关性，并比较接受 CPI 与化疗的患者之间的差异。持久反应被定义为在270天的研究期内具有完全反应/部分反应且没有进展。标准的血液分析物 (例如白蛋白和淋巴细胞) 仅仅是一种预测因子，与治疗类型无关的临床结果有关。肿瘤 PD-L1 高表达 (≥50% 肿瘤细胞染色) 特别与对 CPI 的反应相关 (OR 0.20; 95% CI 0.13 至 0.30; p<0.001)。该关联在非鳞状组织学、吸烟史或先前化疗的患者中更强，而不是鳞状组织学、无吸烟史或第一线 CPI 的患者中更强。更高的肿瘤突变负荷 (TMB) (≥10.44 mut/Mb) 也特别与对 CPI 的持久反应相关 (OR=0.40; 95% CI 0.29 至 0.54; p<0.001)。高 TMB 和 PD-L1 表达的组合是持久反应对 CPI 的最强预测因子 (OR=0.04; 95% CI 0.00 至 0.18; p<0.001)。PD-L1 或 TMB 水平与化疗的反应之间没有显著关联，这表明了 CPI 特异性的预测效应。标准的血液分析物只有预测效用，而肿瘤 PD-L1 和 TMB 特别预测 NSCLC 中对 CPI 的反应。高 TMB 和 PD-L1 表达组合是持久反应的最强预测因子。PD-L1 在非鳞状组织学、吸烟史或先前化疗的患者中也是更强的预测因子。 © 作者（或其雇主）2023年。根据 CC BY-NC 允许重新使用。不允许商业再利用。由 BMJ 发布。

在儿童肿瘤协作组（Children's Oncology Group）进行的ANBL1221第二阶段试验中，针对首次复发/难治性高风险神经母细胞瘤患者，联合伊立替康和替莫唑胺（I/T）和铁杉酯酶抑制剂（TEMS）或免疫治疗（抗GD2抗体地奴珠单抗（DIN）和粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF））进行治疗。在最初的队列（n=17）中用I/T/DIN/GM-CSF治疗的患者中，响应率为53%。随后增加了更多的患者，以进一步评估该化疗免疫疗法方案与可能存在的免疫生物标志物之间的关系，包括治疗反应和生存率。对患者进行了特定的免疫遗传型评估，这些遗传型可以影响自然杀伤细胞（NK）的活性，包括杀手免疫球蛋白样受体（KIRs）及其配体、Fc-γ受体和NCR3。通过全血细胞计数评估了总白细胞和白细胞亚群，通过外周血单个核细胞的流式细胞术评估了免疫细胞亚群和表面标记的表达与临床结果之间的可能关联。进行了适当的统计分析。在必要时进行了Bonferroni校正。 在评估的免疫遗传型中，某些KIR及其配体的存在或不存在与化疗免疫疗法的临床结果相关，而不是与I/T/TEMS的治疗结果相关。虽然响应者和非响应者的CD161、CD56和KIR中位数值不同，但在逻辑回归模型中没有统计学意义。白细胞和中性粒细胞计数与生存结果的差异相关，但在接受化疗免疫疗法的患者中，事件风险的增加并不具有临床意义。 这些发现与早期的研究一致，显示KIR/KIR配体基因型与神经母细胞瘤儿童接受抗GD2免疫疗法后的临床结果相关。当前研究证实了在临床试验中针对复发或难治疾病患者实施的I/T/DIN/GM-CSF化疗免疫疗法中，KIR/KIR配体基因型的重要性。这些结果很重要，因为该方案现在广泛用于首次复发/难治疾病患者的治疗。评估NK细胞及其影响其功能反应的基因在免疫治疗中的作用的努力正在进行中。 NCT01767194。©作者（或其雇主）2023。根据CC BY-NC许可进行再利用。不允许商业再利用。由BMJ出版。

所有扩散性大B细胞淋巴瘤（DLBCLs）中有大约一半被大量的调节性T细胞（Tregs）浸润。尽管特别是“效应器”Tregs的存在与采用标准的利妥昔单抗加环磷酰胺、多柔比星、长春瑰菜碱和泼尼松（R-CHOP）免疫化疗治疗的患者不良预后有关，但这种细胞类型在淋巴瘤发生和进展中的作用尚不清楚。在这里，我们使用含有预期收集的DLBCL患者标本的组织微阵列，以及来自公开可用队列的数据，探索Treg浸润的DLBCL的突变谱系。我们进一步利用MYC驱动淋巴瘤模型来机械性地分析Treg对淋巴瘤发病机制的贡献，并开发Treg选择性白细胞介素-2（IL-2）饥饿策略，以改善MYC驱动淋巴瘤的免疫控制。我们发现，除了一种特征为并存MYD88 / CD79突变的亚型外，所有遗传性DLBCL亚型都受到Treg的严重浸润。光谱流式细胞术和单细胞RNA测序揭示了Treg对MYC驱动淋巴瘤浸润具有功能性和免疫抑制标记的强烈表达；值得注意的是，我们发现肿瘤接触时的内部性Treg来自于CD4 +幼稚祖细胞的局部转化。 Foxp3iDTR小鼠中的Treg消融，或通过抗体介导的Treg选择性阻断IL-2信号来强烈降低淋巴瘤负担。我们确定淋巴瘤B细胞是IL-2的主要来源，并显示Treg清除同时清除Foxp3-阴性CD4 + T细胞，而不是CD8 + T细胞或自然杀伤T（NK）细胞。 Tregs对ATP水解和腺苷生产的抑制至少部分呈现出Treg消除的效果。 Treg消融进一步与促凋亡的CD40激活相辅相成，以保持持久的反应。综合数据表明，Treg是DLBCL的潜在治疗靶点，特别是与其他免疫治疗联合使用。 ©作者（或他们的雇主）2023年。在CC BY-NC下允许再利用。不能进行商业再利用。由BMJ出版。

卵巢癌是最凶险的恶性妇科肿瘤。多形核磷酸酯酶源性抑制细胞（PMN-MDSCs）参与了卵巢癌并与不良结局密切相关。然而，PMN-MDSCs的免疫抑制机制仍然不清楚。通过生物信息学分析和免疫组织化学染色，研究了ANKRD22表达细胞的类型和数量。利用CRISPR-Cas9技术构建了Ankrd22-/- C57BL/6小鼠。通过GM-CSF和IL-6处理并经过荧光激活细胞分选，从骨髓（BM）来源CD11b+Ly6G+Ly6Clow细胞中获得了小鼠PMN-MDSCs，并通过流式细胞仪（FCM）和ELISA评估了PMN-MDSCs的免疫抑制活性。通过FCM确定了CCR2的表达水平和外源性葡萄糖摄取能力。使用RT-qPCR检测来自人类卵巢癌组织中的CD11b+HLA-DR-CD14-CD15+细胞中的ANKRD22表达，并通过χ2检验评估ANKRD22表达与患者临床特征和预后的相关性。我们发现了一个参与调节PMN-MDSCs免疫抑制能力的新蛋白质，ANKRD22。Ankrd22在小鼠CD11b+Ly6G+Ly6Clow细胞中表达高，并可在暴露于模拟微环境刺激后显着下调。Ankrd22的敲除增加了CD11b+Ly6G+Ly6Clow细胞的CCR2表达水平和PMN-MDSCs的免疫抑制活性。来自Ankrd22-/-小鼠的BM来源CD11b+Ly6G+Ly6Clow细胞在肿瘤异种移植小鼠模型中显着促进了卵巢癌细胞的增殖。RNA测序表明，Ankrd22敲除对BM来源CD11b+Ly6G+Ly6Clow细胞中的Wdfy1表达明显增加，并且Wdfy1的异位表达增加了Ankrd22+/+ PMN-MDSCs的Arg1、Inos、Ido和Pdl1水平。出乎意料的是，ANKRD22激活候选小分子化合物减弱了Ankrd22+/+ PMN-MDSCs的免疫抑制活性。最后，我们发现来自原发性卵巢组织中CD11b+HLA-DR-CD14-CD15+细胞中低ANKRD22水平与更高的国际妇产科联合会阶段、更高的复发率和更高的中性粒细胞/淋巴细胞比率相关。这些结果表明，ANKRD22是逆转PMN-MDSCs免疫抑制效应的潜在新靶点。©作者(或其雇主) 2023。在 CC BY-NC 下允许重新使用。不允许商业再利用。由BMJ出版。

患者的T细胞可在体外改造，使其表达具有定义的新型抗原特异性的T细胞受体（TCR），成为一种方便的癌症治疗方式。在大多数情况下，CD8+ T细胞表达限制于主要组织相容性（MHC）I的TCR，而CD4+ T细胞的开发则滞后于表达限制于MHC II的TCR。关键是选择目标抗原，无论表位是否高效处理且与MHC分子具有高亲和力。转化生长因子β受体2(TGFβR2(-1))基因的突变在微卫星不稳定的结肠和胃癌中经常出现，因此是一种真正特异性的肿瘤抗原，多位患者检测到它。以人类MHC II分子HLA-DRA/DRB1*0401(HLA-DR4)限制的多样人类TCR库ABabDR4小鼠，受TGFβR2(-1)肽段免疫，然后从响应的CD4+ T细胞中分离出TGFβR2(-1)-特异性TCR。表达TGFβR2(-1)-特异性TCR的人类CD4+ T细胞通过共培养和其他功能性检验来评估它们的效力和安全性。我们证明了TGFβR2(-1)新抗原是有免疫原性的，在ABabDR4小鼠中引发CD4+ T细胞的反应。当表达于人类CD4+ T细胞中时，HLA-DR4限制的TGFβR2(-1)-特异性TCR在低TGFβR2(-1)肽段的数量下诱导IFNy表达。TGFβR2(-1)-特异性TCR识别HLA-DR4+淋巴母细胞瘤细胞，这些细胞内源性处理并呈现新抗原，并识别自然表达TGFβR2(-1)突变的结肠癌细胞系SW48和HCT116。没有观察到MHC II的非同种反应性或对具有相似TCR识别模体的肽段的交叉反应性，表明TCR的安全性。数据表明，HLA-DR4限制的针对TGFβR2(-1)复发新抗原的TCR可成为大量癌症患者的采用性T细胞治疗有价值的候选物。©作者(或其雇主)2023。根据CC BY-NC的规定进行重复使用。不商业用途。由BMJ出版。

上皮性卵巢癌（EOC）是女性癌症相关死亡的前五大原因之一，主要由于恶性细胞在诊断前早期散播至腹膜。尽管医学治疗有所改善，特别是采用针对同源重组缺陷的新型药物，但是患有EOC的患者的生存率仍然很低。与其他肿瘤不同，EOC对免疫检查点抑制剂仍然相对不敏感，这与肿瘤微环境（TME）有关，该TME以免疫细胞浸润不足和以具有促癌性质的免疫成分为主的活性免疫抑制为特征，特别是肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）。近年来，TAMs作为潜在的治疗靶点受到关注，试图通过寻求扭转TME中的免疫抑制和增强免疫疗法的临床疗效。在这里，我们回顾了影响肿瘤进展的TAMs的关键生物特征以及它们作为治疗EOC潜在靶点的相关性。我们特别关注治疗方法，即调节EOC TME中的TAMs的招募，极化，存活和功能特性，以开发优越的免疫疗法联合方案，用于患有EOC的患者的临床护理。©作者（或其雇主）2023年。在CC BY-NC下允许重新使用。不允许商业再使用。由BMJ出版。

PD-L1（CD274）扩增发生在少数恶性肿瘤中，并可能预测免疫治疗的抗-PD-1/PD-L1反应性。我们假设，肿瘤相关PD-L1扩增的拷贝数（CN）和焦点性会影响蛋白质表达，并分析了在Foundation Medicine于2016年3月至2022年2月期间进行全面基因组分析的实体肿瘤样本。使用比较基因组杂交样品测序法检测到PD-L1 CN变化，并通过免疫组化（IHC）与PD-L1蛋白表达（DAKO 22C3抗体）进行相关性分析。总体上，分析了60,793个样本（最常见的组织学类型为肺腺癌（20％）、结肠腺癌（12％）、肺鳞癌（8％））。使用CD274 CN ≥ 样本倍体数+4（6个拷贝）的定义，发现1.21％的肿瘤（738/60793）具有PD-L1扩增。焦点性别类分布如下：<0.1 mB（n=18（2.4％）），≥0.1至<4 mB（n=230（31.1％）），≥4至<20 mB（n=310（42％）），≥20 mB（n=180（24.4％））。较低水平的PD-L1扩增（低于样本倍体数+4）相对更常见于非焦点扩增比高水平。此外，更焦点的扩增（<0.1 mB）与更高的PD-L1 IHC表达相关。根据焦点，PD-L1扩增（倍性≥+4）样本的中位瘤细胞比例分数（TPS）分别为87.5％（<0.1 mB），80％（≥0.1至<4 mB），40％（≥4至<20 mB），1％（≥20 mB）。在PD-L1倍性小于+4但高度焦点性（<0.1 mB）的样本中，TPS为PD-L1表达量的第75个百分位为80％。相反，非焦点（≥20 mB）PD-L1扩增（倍数≥+4）可能表现出高PD-L1表达（TPS≥50％），尽管很少见（我们队列中的0.09％）。总之，IHC测量的PD-L1表达受PD-L1扩增水平和焦点影响。 PD-L1等可靶向基因的扩增、焦点、蛋白质表达和治疗效果之间的进一步相关性有待探索。 ©作者（或其雇主（们））2023。 在CC BY-NC下允许重复使用。 不得进行商业重用。由BMJ出版。

免疫检查点阻断（ICB）治疗在肝细胞癌（HCC）中的效果有限。本研究探讨了利用肿瘤代谢转换增强HCC对免疫疗法的敏感性的可能性。评估了HCC非肿瘤和肿瘤组织中一碳（1C）代谢水平和磷酸丝氨酸磷酸酶（PSPH）的表达，PSPH是1C途径的上游酶。通过体外和体内实验研究了调节单核/巨噬细胞和CD8+ T淋巴细胞浸润的PSPH的作用机制。HCC肿瘤组织中PSPH明显上调，其水平与疾病进展呈正相关。PSPH敲低抑制了免疫竞争小鼠的肿瘤生长，但对单核/巨噬细胞或T淋巴细胞缺陷小鼠的肿瘤生长没有影响，说明PSPH的促肿瘤作用依赖于两种免疫成分。机制上，PSPH通过诱导C-C基序趋化因子2（CCL2）的产生促进单核/巨噬细胞浸润，同时通过抑制肿瘤坏死因子α（TNF-α）条件下C-X-C基序趋化因子10（CXCL10）的产生减少CD8+ T淋巴细胞的招募。谷胱甘肽和S-腺苷甲硫氨酸部分参与了CCL2和CXCL10的调控。Cancer细胞的shPSPH（短发夹RNA）转染增强了肿瘤对抗程序性细胞死亡蛋白1（PD-1）治疗的敏感性，而且metformin可以抑制癌细胞中的PSPH表达并模拟shPSPH的作用，增强肿瘤对抗PD-1治疗的疗效。通过将免疫平衡向肿瘤友好组成倾斜，PSPH可能既可作为ICB治疗中患者分层的标志物，也可作为治疗人类HCC的有吸引力的治疗靶点。 ©作者（或其雇主）2023年。CC BY-NC允许再利用。不得进行商业再利用。由BMJ发布。

固体肿瘤对嵌合抗原受体（CAR）T细胞治疗具有独特的阻碍作用，包括T细胞存留时间有限、肿瘤浸润效率低、以及免疫抑制性肿瘤微环境。迄今为止，克服这些障碍的尝试并不令人满意。本文报道一种策略，即将Runx3（编码RUNX家族转录因子3）过表达与外体蛋白激酶B（AKT）抑制相结合，以生成既具有中央记忆又具有组织驻留记忆特性的CAR-T细胞以克服这些障碍。我们生成了表达针对人类碳酸酐酶9的二代小鼠CAR-T细胞，配合Runx3过表达并在AKTi-1/2的存在下扩增，这是AKT1/AKT2的选择性和可逆抑制剂。我们利用流式细胞术、转录组学分析和质谱细胞术探索了AKT抑制剂（AKTi）、Runx3过表达及其组合对CAR-T细胞表型的影响。在皮下胰腺导管腺癌（PDAC）肿瘤模型中评估了CAR-T细胞的存留、肿瘤浸润和抗肿瘤功效。AKTi生成了CD62L+中央记忆型CAR-T细胞群体，具有增强的存活时间，但也可促进其细胞毒性潜力。Runx3过表达与AKTi相配合，生成了既具有中央记忆又具有组织驻留记忆特性的CAR-T细胞。Runx3过表达加强了CD4+CAR T细胞的潜力，并与AKTi相配合，抑制了由调节信号引起的CD8+CAR T细胞的末级分化。虽然AKTi促进了CAR-T细胞的中央记忆表型，但扩张能力显著增强；Runx3过表达促进了CAR-T细胞的组织驻留记忆表型，并进一步增强了细胞的存留力、效应器功能和肿瘤驻留。这些新型AKTi生成的Runx3过表达CAR-T细胞在皮下PDAC肿瘤模型中表现出强大的抗肿瘤活性，并对程序性细胞死亡1阻滞有良好的响应。Runx3过表达与外体AKTi相配合，生成了具有组织驻留和中央记忆特性的CAR-T细胞，这装备了CAR-T细胞更好的存活时间、细胞毒性潜力和肿瘤驻留能力，以克服固体肿瘤治疗中的障碍。 ©作者（或其雇主（S））2023年允许重用CC BY-NC。不允许商业再利用。由BMJ发布。

肿瘤微环境中的癌相关成纤维细胞（CAFs）对天然杀伤（NK）细胞的功能造成影响，而NK细胞已被证明是一种有前途的治疗方式。CAFs和NK细胞之间的相互作用有重要的免疫反应抑制作用，表明针对CAFs的治疗是有效的NK介导肿瘤杀伤的潜在靶点。为了克服CAFs引起的NK功能障碍，我们选择了一种抗纤维化药物nintedanib进行协同治疗。为了评估协同治疗的疗效，我们建立了体外的3D Capan2 /患者来源的CAFs球模型或体内的混合Capan2 / CAF 肿瘤异种移植模型。通过体外实验揭示了NK介导的nintedanib 协同治疗的分子机制。随后评估了体内的治疗协同效果。此外，通过免疫组织化学方法测量了患者来源的肿瘤切片中靶蛋白的表达得分。Nintedanib阻断了血小板衍生生长因子受体β（PDGFRβ）信号通路，减少了CAFs的激活和生长，显著降低了CAFs分泌的IL-6。此外，nintedanib的联合使用提高了介质素（MSLN）靶向嵌合抗原受体-NK介导的对CAFs /肿瘤球体或异种移植模型的肿瘤杀伤能力。协同组合导致了强烈的NK细胞浸润。Nintedanib单独使用没有效果，而IL-6跨越信号阻断改善了NK细胞的功能。MSLN和PDGFRβ + -CAFs人群区域的表达组合是一种潜在的预后/治疗标志物，并与较差的临床结局相关。我们针对PDGFRβ + -CAF含量的胰腺癌的策略可以提高胰腺导管腺癌的治疗效果。